实验报告 (2)
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免疫检验技术
实践报告
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实践一 直接凝集试验
一、玻片凝集试验（（细菌鉴定）
（一）实验目的
1，学会细菌玻片凝集试验的操作和结果判断。
2，理解抗原抗体反应的特异性，能做出正确的检验报告。
（二）实验原理
玻片凝
集试验是用已知的诊断血清，与被检的未知细菌进行凝集试验，如出现特异性凝
集，可确定被检细菌的种
属或型别。
（三）实验材料
1，待检细菌：
2，试剂：诊断血清：
3，器材：玻片、接种环、酒精灯
（四）实验结果记录
反应物
（五）实验报告
（六）实验讨论
1，志贺菌抗体与伤寒沙门菌能发生凝集吗？为什么？
2，做玻片凝集试验时，应怎样操作才能使凝集现象明显，利于结果的判断？
报告者：
报告日期：
反应现象
（凝集或不凝集）
结果判断
（阳性或阴性）
..
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二、试管凝集试验（肥达反应常量法）
（一）实验目的
1，学会试管直接凝集试验的操作方法，熟练使用吸量管移液并进行连续二倍稀释。
2，能够正确进行首管血清喜事度的计算。
3，能够准确判断试管凝集试验的各级凝集程度和凝集效价，并准确报告结果。
（二）实验原理
肥达试验是用伤寒沙门菌的H（鞭毛）和O（菌体）以及甲型（A）、乙型（
B）副伤寒
沙门菌的诊断菌液与病人血清做凝集试验，对伤寒、副伤寒作辅助诊断。如果需要，有些地<
br>区可增加丙型（C）副伤寒沙门菌等其他沙门菌的诊断菌液。
（三）实验材料
1，诊断菌液
2，待检血清
3，器材：小试管、刻度吸管、试管架等
（四）实验结果记录
试管号
血清最终稀释度
TO菌液反应现象
TH菌液反应现象
PA菌液反应现象
PB菌液反应现象
（五）实验报告
（六）实验讨论
1，如何进行血清的连续二倍稀释？
2，如果首管血清要求是1：15稀释，稀释后的总液量是3ml，应该如何进行稀释？
3，试管直接凝集反应，是稀释抗原还是稀释抗体？为什么？
4，应如何观察试管凝集反应的结果？
报告者：
报告日期：
1
2
3
4
5
6
对照管
*反应现象分别以—、+、++、+++、++++表示。
..
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三、大孔反应板法（肥达反应微量法）
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，待检血清
2，试剂：
3，器材：大孔反应板、吸量管、盖玻板
（四）实验结果记录
孔号 1 2 3 4 5 6 7 生理
盐水
对照
血清最终稀释度
TO菌液反应现象
TH菌液反应现象
PA菌液反应现象
PB菌液反应现象
PC菌液反应现象
（五）实验报告
（六）实验讨论
报告者：
报告日期：
阳性
血清
对照
*反应现象分别以—、+、++、+++、++++表示。
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实践二 环状沉淀试验（CRP检测）
（一） 实验目的
（二） 实验原理
（三）
实验材料
1， 肺炎球菌C多糖（诊断试剂）
2， 待检血清
3，
小试管、毛细滴管、试管架等。
（四） 实验结果记录
反应物
待检血清+C多糖诊断试剂
待检血清+生理盐水
（五） 实验报告
（六） 实验讨论
应怎样进行环状沉淀试验的结果观察？
报告者：
报告日期：
实验管
对照管
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实践三 免疫比浊测定法（IgG定量测定）
（一）实验目的
熟悉免疫比浊测定法的原理、方法及结果判断。
（二）实验原理
本试验以透射比浊法检测人血清IgG。在反应系统中保持抗IgG（抗体）过量时，所形
成
的免疫复合物与IgG（抗原）的量呈正相关，而形成的浊度与入射光的衰减呈正相关，测
定吸光度A值
可反映液相中的IgG量。通过参照标准曲线得知待测血清红IgG含量。
（三）实验材料
1，待检血清、标准血清、人IgG参考品
2，聚乙二醇-氟化钠溶液
3，其他试剂：羊抗人IgG抗血清、生理盐水、蒸馏水等
4，
器材：分光光度计721、水浴箱、微量移液器、刻度吸管、试管等
（四）操作方法
1，系列参考管用生理盐水稀释人IgG参考标准品，使其浓度分别为5.5gL、11.0 gL、
22.0 gL、44.0 gL（浓度可根据不同制剂变动）。取上述IgG参考标准液各10μl分
放于4
个试管中；另取生理盐水10μl，放于第5支试管中，作为空白对照。分别做好标记。
2，血清测定管将待检血清和标准血清均做1：10稀释（0.1ml待检标准血清+0.9ml生
理
盐水），混匀。各取10μl分放于预先标记的试管中。
3，抗体准备用PEG-
NaF溶液稀释羊抗人IgG抗血清（按商品效价稀释）。
4，抗原抗体反应向上述参考管、空白管、标准管、待测管中分别加入稀释抗血清1.0ml，
混匀后置37℃水浴30分钟。
5，
比浊用分光光度计进行测定，使用340nm波长，用生理盐水空白管校正零点。逐次
测定各参考管、标准管和待测管，准确读取和记录各自的A值。
（五）实验结果记录
参考标准品1：
10
参考标准品1：
16
参考标准品1：
20
参考标准品1：
32
待检血清
（1：10）
标准血清
（1：10）
生理盐水
PEG-
羊抗人IgG
340nm波长（A）
1ml
1ml
1ml
1ml
1ml
1ml
10μl
1ml
10μl
10μl
10μl
10μl
10μl
1
10μl
2
3
4
5
6
7
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（六）实验报告
（七）实验讨论
报告者：
报告日期：
实践四 单向琼脂扩散试验（IgG定量检测）
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，1.0%琼脂凝胶
2，参考血清：
3，特异性抗血清：
4，待检血清
5，其他：载玻片、三角烧杯、试管、移液管、微量加样器、有盖搪瓷盘、打孔器、温
箱等。
（四）实验结果记录
..
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标准1 标准2 标准3
标准4 标准5 测定
直径（mm）
绘制标准曲线：
（五）实验报告
（六）实验讨论
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报告者：
报告日期：
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实践五 双向琼脂扩散试验、对流电泳
一、双向琼脂扩散试验
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，1%琼脂
2，待测抗原（抗体）、已知抗体（抗原）
3，其他物品：载玻片、打孔器、带盖搪瓷盘、滴管等
（四）实验结果记录
1
6
5
4
（五）实验报告
（六）实验讨论
..
2
3
报告者
报告日期：
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二、对流电泳
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，缓冲液PH8.6醋酸-巴比妥钠
2，1%琼脂
3，抗体：
4，抗原：
5，电泳仪、打孔器、载玻片、加样器等
（四）实验结果记录
结果
电泳时电压
电泳时间
（五）实验报告
（六）实验讨论
报告者
报告日期：
阳性对照
阴性对照
待检血清
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实践六 酶联免疫吸附试验
ELISA夹心法测HBsAg
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，试剂盒
2，待检血清
3，酶联仪
（四）实验结果记录
（五）实验报告
（六）实验讨论
1，试验过程中，洗涤的目的是什么？
2，ELISA阳性有何临床意义？
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报告者：
报告日期：
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实践七 斑点金免疫层析技术检测HCG
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，测试条
2，待检者尿液
（四）实验结果记录
对照线：
检测线：
（五）实验报告
（六）实验讨论
试分析以下结果：
1， 仅对照线呈红色。
2， 检测线、对照线均未呈红色。
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报告者：
报告日期：
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实践八 中性粒细胞吞噬功能的检测
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，0.5%甘油
2，45.0gL
NaCl
3，葡萄球菌菌液
（四）实验结果记录
计数中性粒细胞总数
吞噬率%=
（五）实验报告
（六）实验讨论
1，人体内的吞噬细胞有哪些？
3， 中性粒细胞吞噬功能检测的注意事项是什么？
报告者：
报告日期：
吞噬葡萄球菌的中性粒细胞数
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实践九 血清总IgE的检测（ELISA法）
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）实验材料
1，试剂盒
2，待检血清
（四）实验结果记录
1，标准品检测结果记录
标准品浓度（Uml）
吸光度值（A）
2，待检血清检测结果记录
反应物
待检血清
（五）实验报告
（六）实验讨论
1，实验材料和操作方法对实验结果有何影响？
2，说明实验结果的临床意义。
..
0
10
50
100
根据标准品检测结果制备标准曲线。
吸光度值
IgE浓度
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报告者：
报告日期：
实践十 抗链O试验（胶乳法）
（一）
实验目的
（二） 实验原理
（三）实验材料
1，抗链O检测试剂盒
2，待检血清
（四）实验结果记录
1，定性检测
反应物
待检血清
2，半定量检测
稀释倍数
待检血清中ASO含量
（IUml）
检测结果
..
反应现象
（凝集或不凝集）
1：2
400
1：4
800
结果判断
（阳性或阴性）
1：8
1600
（五）实验报告
（六）实验讨论
1，实验材料和操作方法对实验结果有何影响？
2，说明实验结果的临床意义。
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报告者：
报告日期：