回忆往事的作文-廉政准则学习心得

1.抗原抗体反应的原理、特点、种类以及主要影响因素
原理：、Ab能特异性结合（内因）： Ag、Ab能特异性结合，是由于Ag表位(抗原决
定簇)和Ab V区之间的特异性结合，二者在空间结构上是严格互补的。
、Ab结合力（外因）：静电引力、范德华力、氢键以及疏水作用力
特点：特异性、比例性、可逆性、阶段性
种类：沉淀反应、凝集反应、补体参与的溶血反应补体结合试验、中和试验、免疫标记技
术。
影响因素：1．自身因素：（1） Ag：与Ag的理化性质、抗原表位的数目及种类有关；
（2）Ab：与Ab的来源有关：是R 型抗体或H 型抗体；
与Ab的特异性、亲合性、浓度有关。
2.环境因素：（1）电解质：一般实验室所用电解质都是生理盐水（0.9% NaCl），浓
度不能过高。浓度过高，会使Ab蛋白质优先沉淀而出现盐析现象。
（2）PH：一般为PH 6-9。当PH<3时，可出现颗粒性的非特异性凝集，称酸凝
集；当PH过高，可造成碱变性。
（3）温度：抗原抗体反应的常用温度为37°C。

2.什么是交叉反应，有无特异性，为什么？在临床工作中有何意义？
交叉反应(cross- reaction)----抗体对具有相同或相似抗原表位的不同抗原所发生的反应。
交叉反应并没 有违背Ag、Ab特异性结合的原则，其产生的先决条件是不同抗原之间存
在共同的Ag表位。
交叉反应的意义：
• 1. 协助免疫学诊断：eg 外斐氏反应等:用变形杆菌OX19、 OX2、OXk作抗原查血
清抗体，诊断斑疹伤寒（立克次氏体感染所致）
• 2.可造成免疫病理损害：eg 链球菌感染后易导致肾小球肾炎，其原因为链球菌与人
体肾小球基底膜有共同Ag表位所致。

3.玻片凝集试验和试管凝集试验的区别
玻片凝集试验：定性试验 用已知抗体检测未知抗原 用途：ABO血型鉴定、菌种鉴定
试管凝集试验：半定量试验 用已知抗原检测未知抗体的效价
用途：病原微生物感染的免疫学诊断
1.肥达氏反应(Widal test)-诊断伤寒
2.外斐氏试验(Weil-Felix test) -诊断斑疹伤寒

4.反向间接凝集试验、间接凝集抑制试验的原理及实例
反向间接凝集反应原理：将已知抗体吸附于颗粒性载体上，检测未知抗原
实例：反向间接血凝试验
间接凝集抑制反应原理：用抗原致敏的颗粒及相应的抗体作为诊断试剂，检测 标本中是否存
在与致敏抗原相同的抗原
实例：用胶乳凝集抑制试验检测尿液中绒毛膜促性腺激素（HCG）

5.协同凝集试验的原理
原理：实质为反向间接凝集反应 葡萄球菌A蛋白（Staphylococcus protein A, SPA)能非特
异地与Ig G的Fc段结合,当与特异性抗原相遇时，IgG的Fab段与抗原结合，出现金葡菌的
凝集现象（属特 殊间接凝集试验）

6.比较沉淀试验和凝集试验的异同
凝集反应：颗粒性抗原 光镜下可见，肉眼观呈浑浊悬液，如细菌、RBC等。
凝集反应实验中为使抗原抗体比例（数量）恰当，应稀释Ab
沉淀反应：可溶性抗原 光镜无形态，肉眼观呈澄清透明，如血清蛋白溶液、多糖抗原等。
实验中为使抗原抗体比例（数量）恰当，应稀释Ag

7.双扩、单扩、对流免疫电泳、免疫电泳实验的原理，方法，用途。
双扩：将抗原与抗体加 在同一琼脂板对应孔中，各自向对方扩散，在浓度比例恰当处形成沉
淀线，观察沉淀线的位置、形状以及 对比关系，可对抗原或抗体进行定性分析。
方法：
1) 制琼脂板(3ml 1.5%NS琼脂）
2) 打孔（双孔型三角孔型梅花孔型）
3) 加样（平孔沿加满）
4) 扩散（37C、24 h观察结果）
用途：
1) 已知Ag或Ab检测未知Ab或Ag的浓度及分子量：双孔型
2) 抗原性质分析：三角孔型
3) 测Ag有效稀释度或Ab的效价：梅花孔型
4) 鉴定Ag或Ab纯度： 一条沉淀线，纯；多条沉淀线，不纯
单扩：将一定量的抗体混于琼脂凝胶中，使待测的抗原溶液在琼脂 内由局部向周围自由扩散，
在一定区域内形成可见的沉淀环，测量环的直径或计算环的面积来定量抗原。
方法：
1) 已知定量Ab+琼脂制板、打孔
2) 在琼脂板小孔中加入待测的梯度Ag
3) Ag向四周扩散形成沉淀环
4) Ag浓度与沉淀环直径呈线性关系绘制标准曲线
5) 从标准曲线上查出并计算
6) 待测标本含量
用途：定量测定抗原，如测 IgG、IgA、IgM、C3等含量
对流免疫电泳:定向加速的免疫双扩（双扩＋电场，使抗原、抗体相对泳动）
方法：抗原、抗体分别在琼脂板上不同孔内，抗原在负极端，抗体在正极端，电泳。

电压：4~6vcm(琼脂长度）
电泳时间：45分钟~1小时
优点：简便、快速；反应敏感度达μgml
用途：常用于AgAb的效价及纯度鉴定
免疫电泳实验:原理：Ag区带电泳＋双扩结合
方法： 电泳分出区带
、Ab免疫双扩
用途：分析复杂抗原组分,常用于分析复杂Ag的组分。（如人全血清组分的分析）
多发性骨髓瘤等疾病的测定

8.影响电泳的因素有哪些？
1.与溶液的pH有关：常用pH8~9，蛋白质带负电
2.与溶液离子强度有关：愈高，泳动慢，一般0.02~0.2M
3.与电场强度有关：愈高，愈快，一般4~6vcm（琼脂长），约40v左右
4.电渗作用的影响
电渗作用：电场中液体对于一固体的固定相对移动的现象。电渗方向与电泳方向相反。

9.免疫标记技术的原理
用可以微量检测的标记物（示踪物质）标记抗原或抗体，作为试剂， 与相应抗体或抗原结合
反应后，测定抗原抗体复合物中的标记物，从而推断所测抗体或抗原有无及量的多 少。
免疫标记技术 =免疫技术(抗原抗体反应)+ 标记技术(示踪物标记)

10.免疫荧光技术中最常用的荧光素是什么？
1.异硫氰酸荧光黄(FITC):可发出黄绿色荧光
2.四乙基罗丹明（RB200): 发出橘红色荧光
3.藻红蛋白（PE）:发出橙色荧光
4.镧系螯合物：铕（Eu3+)、 铋(Tb3+)、铈(Ce3+)等螯合物。荧光衰变时间长，适合时间分辨
荧光免疫测定

11.免疫荧光显微染色的各种方法及优缺点
1.直接法 优点： 快、直接、干扰因素少，特异性强，
缺点：每检测一种抗原需标记相应的荧光抗体,一种荧光抗体只能检测一种抗原，较麻烦
2.间接法：优点：制备一种荧光标记二抗（抗抗体）可用于多种Ab检测、灵敏度高
缺点：易产生非特异性荧光
3.补体法：优点：灵敏度高，制备一种荧光抗补体用于多种检测
缺点：干扰因素多，补体不稳定，易失活，该法少用
4.双标记法 检测同一标本上的两种抗原

12．发光免疫技术、金免疫技术的原理
发光免疫技 术将发光系统与免疫反应相结合，来检测抗原、或抗体的方法。改变所加底物，
使产物能发光，用仪器检 测发光强度，判断结果。
金免疫技术：采用胶体金作为标记物，来检测抗原、或抗体的方法

13.用金标记免疫法（斑点免疫层析试验）检测HCG的原理

以 硝酸纤维素膜为载体，利用微孔膜毛细管作用，使膜一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如
层析


的原理、方法（以间接法测抗体和双抗夹心法为例）及影响因素。
原理：将酶分 子与Ab或Ag连接成一酶结合物（酶标记物），当它与固相载体中相应Ag或
Ab相遇，形成酶标记的 AgAb复合物，加入底物，酶催化底物，生成有色产物，根据颜色
深浅可测出溶液中Ag或Ab的量。

间接法测抗体
• 包被已知Ag＋待测标本（测Ab？） ——反应一段时间后，洗涤——加酶标抗抗体
（酶标羊抗人IgG）——洗涤——加底物——加终止液 ，观察结果。
影响因素
（一）固相载体
常用固相载体材料：聚苯乙烯。其特点为吸附Ag或Ab的能力强，一但吸附后，不
能被洗脱。
固相载体：酶标板（微量反应板，12×8；
可分软、硬板
一次性使用，不可回收
（二）抗原、抗体

Ag：需纯化
Ab：需效价高、亲和力强、纯化
（三）试验条件
1.包被（coating)：一般用pH 9.6 CB(carbonate buffer)，0.05M, 有利于蛋白质吸附
包被浓度：0.1~100gml，一般常用10 gml
包被时间、温度：4 ℃过夜或37 ℃ 1-3h
包被量：100ul
封闭(blocking)：用1%~5% 牛血清白蛋白或5%~20%小牛血清或脱脂牛奶缓冲液浸泡 1~2h
2.抗原抗体反应的条件
（1）微碱性有利于抗原抗体结合，故用pH 7.4 PBS(phosphate buffer saline)洗涤
（2）去污剂有利于AgAb形成，洗液中加0.05% Tween-20
（3）Ag、Ab反应时间、温度： 一般 37℃、30~40min
3.洗涤
采用 PH7.2-7.4PBS洗涤，规一化，每次浸泡1~2min，拍干，共洗涤3~4次
4.酶促反应条件
温度 37℃
时间 10min
pH 5.5
底物量 一致
5.排除干扰：多设对照

15. ELISA试验应设哪些对照，为什么？

16.判断ELISA试验结果的方法。
（一）肉眼判定：与阳性、阴性对照颜色比较：
1.若待检孔显色浅于阴性对照则判定为阴性；
2.若待检孔显色深于或等于阳性对照孔则判定为阳性；
3.若待检孔显色介于阴性对照孔和阳性对照孔之间则判定为弱阳性。
（二）酶标光度仪检测A492值 （吸光率）：比色法
1.与阳性、阴性对照测定值比较
比值：大于2.0为阳性，小于2.0为阴性
P: positive（待测吸光度值）
N: negative

17.免疫血清制备的主要程序。

抗血清（免 疫血清）：含有某种抗体的血清。它是将抗原按一定的程序免疫动物，一定时间
后，采集动物血液，经分 离得到。
（1）动物的选择
（2）抗原的条件
（3）佐剂的应用
（4）免疫方法
(5)试血和放血
（6）鉴定和保存

18.佐剂概念、作用机理、福氏不完全完全佐剂的组成。
佐剂（adjuvant)：同A g一起或预先注入机体，能增强机体对该Ag的免疫应答或改变免疫
应答类型的物质。
作用机理：增加Ag的免疫原性，从而提高抗血清的效价
1.福氏不完全佐剂（Freund’ IA）：组成：羊毛脂＋石腊油，二者比例为4：1
2.福氏完全佐剂（FCA）：组成：羊毛脂＋石腊油＋卡介苗

19.分离提纯免疫球蛋白有哪些方法，其原理是什么？
一. 盐 析 法
在不同 浓度的中性盐中蛋白质会脱水，降低带电电势，由亲水性变为疏水性，分子间相互凝
聚而沉淀（盐析作用 ）。不同蛋白质盐析所需中性盐的浓度不同，故可分离不同蛋白质。
二.离子交换层析法
利 用不同的蛋白质在缓冲溶液中所带电荷不同，与某一载体上的具有相反电荷的离子基团进
行吸附，然后进 行解脱，达到纯化蛋白质目的。
三. 凝胶过滤法
凝胶颗粒是网格状结构，当分子大小不同 的混合物通过凝胶柱时，分子大的先下来，分子小
的则嵌入凝胶颗粒的网状结构中后下来，从而将分子大 小不同的物质分离，即为分子筛的作
用。
四. 亲和层析法
利用抗原抗体的结合具 有特异性、可逆性，将纯化抗原先交联到载体上，制成亲和层析柱，
当Ab（Ig）通过时，与抗原在柱 上特异性结合，Ab中杂质流出。然后通过改变缓冲液 pH、
离子强度，使Ab解脱下来。

20.人体免疫功能包括哪些组成部分？

21.实验室中检测人细 胞免疫和体液免疫最常用哪些试验，这些试验的原理如何？正常值应
为多少？
一.T细胞的计数（T细胞表面标志的检测）
（一）特异性抗原的检测
淋巴细胞表面有一些特异的CD抗原，根据不同的CD抗原可鉴定出不同的细胞群体
CD抗原 ：淋巴细胞群（簇）分化抗原：不同群淋巴细胞在分化成熟过程中，细胞表面出现
或消失的抗原分子
正常值：CD4+CD8+≥1.5
（二）、T细胞特异性受体（E受体）的检测 E花环形成试验
原理：T淋巴细胞表面含有绵羊红细胞（SRBC)受体（CD2)，当T淋巴细胞 与绵羊红细胞
相遇时，T细胞通过该受体吸附绵羊红细胞而形成花环。
花环形成试验（total, 总E花环）正常值：60%~80%
花环形成试验（active,活性E花环）正常值：20%~30%
二.T细胞功能的检测
检测T细胞功能的试验有：
（一）T细胞增殖转化试验原理
淋巴细胞在某些物质刺激下，细胞增殖、分化 （如细胞变大、胞浆增多、出现空泡）
DNA合成增加（核染色质疏松，核仁出现），转化成为淋巴母细 胞。
（二）T细胞分泌功能测定（细胞因子检测）
（三）T细胞介导的细胞毒性检测 细胞毒性T细胞（CTL)具有杀伤靶细胞的功能，它是评价机体细胞免疫水平的指标。
检测该杀伤 作用的试验称为细胞毒试验。
细胞免疫功能体内检测法（体内试验）
— Ⅳ型超敏反应皮试
原理： Ⅳ型超敏反应的本质是细胞免疫，因此Ⅳ型超敏反应为阳性，可反映机体细胞免疫
功能好。
1. 特异性抗原皮肤试验：所用Ag: OT 或 PPD
以OT为例：OT 1:2000 0.1ml 皮内注射，48—72h 观察结果，红肿硬结直径大于0.5cm为
阳性
皮肤试验：

将定量PHA注射到受试者前臂皮内，6~12h后出现红 斑和硬结，24~48h达高峰，直
径>15mm为阳性反应。该法敏感性高，安全可靠。
三.B细胞数量的检测
（一）B细胞表面识别抗原受体（BCR）（SmIg, Surface membrane Ig)的检测
是B细胞表面膜免疫球蛋白，存在于成熟B淋巴细胞膜上，为B细胞结构蛋白。
类型为：IgM、IgD型。
正常值：15%~25%
二）B细胞表面抗原的检测
B细胞表面特有的CD抗原有：CD19、CD20、CD21等。
用抗CD21 的单抗（免疫荧光法、酶免疫组化法）检测外周血淋巴细胞，阳性细胞为B淋
巴细胞，约占总淋巴细胞的 10%~15%。
四.B细胞功能的检测
（一）血清中Ig的测定
检测人免疫球蛋白常用方法：单向琼脂扩散实验、免疫比浊法
正常值：IgG 12gL (7.6~16.6)
IgM 1.3gL (0.4~2.2)
IgA 2.0gL (0.7~3.5)
（二）血型抗体效价的测定
反映体内IgM水平
正常6月婴儿抗 A >1 ：8，或抗 B > 1 : 4;
1岁后抗A>1:16 ，或抗B > 1 ：8
如3岁以上抗A或抗B效价仍 < 1 ：4，
表明IgM缺乏，提示先天性体液免疫功能缺陷。
（三）抗原刺激机体后抗体应答反应（体内试验）
将抗原注射到体内，一段时间后检测相应抗体效价，如抗体效价低，说明机体体液免疫
功能差

22.补体的定义、组成及性质
（一）补体的定义及性质：
 compleme nt：补体是存在于人和动物血清中的一组经激活后具有酶活性的球蛋白，
一般情况下处于未激活状态。
 补体的特性：稳定性差，各种理化因素都可使之失活：如酸、碱、紫外线照射、剧
烈震荡等
 约90％的补体成分由肝细胞合成，少数由巨噬细胞、肠上皮细胞、脾细胞等产生
 补体成分均为糖蛋白，大多为β球蛋白，少数为α或γ球蛋白。
 实验室灭活补体的条件为： 56ºC、30'；
 室温下2天补体也可自然失活；
 由于补体的稳定性差，容易失活，因此作补体的检测必须用新鲜血清
（二）补体的组成：由三部分组成
 1.补体的固有成分：C1-C9，其中C1又包括C1q、C1r、C1s，共9种成分11种蛋 白
分子。其中C9的分子量最小、C3含量最高；
 2.补体的调节蛋白：如C4调节蛋白、C1抑制物、S蛋白等；
 3.补体受体；如C1qR、C3aR等；

50实验的原理、正常值及意义
总补体活性检测原理：
 组成和功能完整的补体系统能使致敏羊红细胞发生溶血；
 羊红细胞的溶血程度与补体的活性成正比；整个曲线呈倒“S”型，即随着补体量增加，
溶血程度也增加
 在50％溶血附近（30％－70%之间），稍微改变 补体量，溶血程度变化明显，因此以
50％判定溶血终点较100％更为敏感，所以该试验称为50％溶血试验（CH50）。
总补体活性参考范围：50－100Uml

24.补体结合实验的原理、结果判断及评价
补体结合试验（CFT）原理：
 补体可与任何一组AgAb复合物结合；
 一旦与某一AgAb复合物结合后，便不再与另一复合物结合。
结果判断：
 不溶血为阳性，即待测物中有相应的Ab或Ag；
 溶血为阴性，即待测物中无相应的Ab或Ag.
优点：
 该试验既可测Ag、又可测Ab；
 Ag既可以是颗粒性Ag、也可是可溶性Ag、甚至可以是块状物，因此检测Ag的范
围广；
 可以用于病毒、立克次氏体、细菌等多种病原体的检测（实际上是测Ag）；
 比较敏感(0.05μgml)、特异；
 结果判断明显：通过有无溶血来观察，无需特殊仪器检测。
缺点：
 参与反应的物质多，影响因素也多；（反应体系中有Ag、Ab、C、羊红细胞、溶血
素）
 在正式试验前需要找出几种物质间最恰当的比例，比较复杂。

25Ⅰ、Ⅳ型超敏反应皮试的原理
Ⅰ型超敏反应皮试
• 当变应原再次进入致敏者 皮肤，与吸附在肥大细胞或和嗜碱性粒细胞上的特异IgE
高变区结合，导致肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱 颗粒，释放生物活性介质：如组胺、
白三烯、激肽等。
• 在20－30分钟内局部皮肤出现红晕、红斑、风团以及搔痒感，数小时后消失。
• 出现此现象者判 断为皮试阳性，即对该变应原过敏；未出现红晕、红斑、风团者为
阴性，即对该变应原不过敏。
Ⅳ型超敏反应皮试
用皮内注射、皮肤斑贴等方法使变应原进入已致敏机体，体内致敏的CD4 +Th1再次遇
到相应抗原后，释放出大量细胞因子，如IL-2、IFN-γ、TNF、IL-3、G M-CSF,
（1）活化巨噬细胞及NK，增强吞噬细胞作用；
（2）吸引WBC到达Ag所在部位，促进吞噬；
（3）促进T细胞增生和分泌细胞因子，加 重局部炎症反应，最后造成局部以单核细胞和淋
巴细胞浸润为主的炎症反应。
（4）48- 72小时后局部出现红肿、硬结或水泡，以此来判断变应原是否引起机体Ⅳ型超敏

反应或 了解机体的细胞免疫功能。


26. 比较Ⅰ、Ⅳ型超敏反应皮试(抗原、时间、结果、意义）

27.免疫复合物的含义及免疫复合物病的致病原因
免疫复合物含义：
（一）含义：immune complex,IC 它主要指AgAb复合物及AgAbC复合物两种。
致病机理：中等大小的IC沉积在体内，通过激活补体、激活血小板、中性粒细胞作用而致
病。

28.免疫复合物检测使用的标准品、出现的问题及WHO推荐的检测方法
目前普遍应用的标准品是HAHG——热聚合人IgG
问题：（1）到目前为止，所有检测IC 的试验，还没有另人满意的标准化措施;
（2）在体外制备的IC还很不稳定，因此用人工合成的复合物作为定量标准不适宜。
WHO推荐的检测方法：
• C1q结合试验、
• 胶固素试验、
• 类风湿因子（RF）试验、
• Raji细胞试验

的基本特征及常见的AID有哪些？
基本特征：
 诱因可有可无。
 有一定的遗传倾向。

女性
患者多见，发病率随年龄增长而增加。
 患者血清中可检出高效价的自身抗体和（或）自身致敏T淋巴细胞。一些自身抗体
在自身免疫病中呈现< br>交叉重叠
现象:即在同一种自身免疫病患者体内可检测到多种
自身抗体，而不同的自身免 疫病也可存在同一种自身抗体。
 IgG、IgA、IgM升高，尤其IgG升高明显。
 病损局部可发现有淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞浸润及免疫复合物沉积。
 免疫抑制剂治疗可取得一定疗效。
常见的AID：系统性红斑狼疮、类风湿性关节、自身免疫性溶血性贫、重症肌无力

的定义及ANAs的组成
抗核抗体（antinuclear antibody, ANA)：
 大多数属IgG类，也有IgM和IgA。无器官特异性和种属特异性，主要存在于血 清
中，也可存在滑膜液、胸水和尿液中。
 ANA 原指抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称。
 ANA广义地指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总和。 ANA所针对的靶抗原由
细胞核扩展到整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架及细胞周期等。
 现已发现有几十种具不同临床意义的ANA，形成抗核抗体谱（antinuclear antibodies,
ANAs）
ANAs的组成

抗DNA抗体：
抗
dsDNA、抗ssDNA抗体
抗组蛋白抗体（AHA)：抗H1、H2A、H2B、H3、H4等
抗ENA抗体：
抗
Sm、
抗核糖核蛋白（
RNP
）
、
抗
SS-A< br>、抗
SS-B等
抗非组蛋白抗体：
抗
Scl-70、
抗Jo-1、抗Ku、
抗增殖细胞核抗原（
PCNA
）
、抗PL-7、抗PL-12、
抗着丝点抗体
等
 抗核仁抗体：抗PM- Scl、抗NOR-90、抗U3nRNA
 抗细胞其它成分抗体：抗高尔基体、抗中心体、
抗线粒体
、
抗肌动蛋白
、抗核层蛋
白等





31.各种AID检测时的代表性自身抗体有哪些？
1 、抗dsDNA抗体对SLE有较高特异性，70-90%活动性SLE患者该抗体阳性，是SLE
的诊 断标准之一。
2、 抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody, AHA） 在
药物性狼疮
患者中阳性率达90-100%，
而SLE病人阳性率仅有20-35% ，类风湿性关节炎病人为36%。
3、抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigen，ENA）抗体
1) 抗Sm抗体 ：抗Sm抗体是SLE的特异性 标志，疾病特异度达99%，为提高
SLE的诊断准确率，可将抗Sm抗体和抗dsDNA抗体同时检测 。
2) 抗SS-A、SS-B抗体 ：抗SS-A和抗SS-B抗体并存是干燥综合症的特异标志。
3) 抗核糖核蛋白抗体 核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP），又称u 1RNP。抗
u1RNP抗体在混合性结缔组织病(MCTD)阳性率为95%以上，是MCTD的标志
抗体。
4、抗Jo-1抗体对肌炎和间质性肺纤维化有高度特异性，抗体的效价与疾病的活动性相关。
5、原发性胆汁性肝硬化（PBC）时AMA（抗线粒体抗体）阳性率可达90%以上。AMA是
PB C的血清学指标。
6、 抗Scl-70是进行性全身性硬化症（PSS）的标志抗体，阳性率为50-64%。

32.在原发性免疫缺陷病中哪一种发生最多？
原发性B细胞免疫缺陷病（占PIID的50~70%），如X连锁无丙球蛋白血症

33. 怀疑体液免疫缺陷应作哪些过筛试验和确诊试验？
1.过筛试验
（1）血清蛋白电泳 丙球定量： 丙球应占总蛋白的15%，大于9.0gL为正常；若小于
2.5gL，应考虑ID
（2）同种血型凝集素测定-ABO血型抗体检测（反映IgM水平）
正常：抗A大于1：8，抗B大于1：4，
若3岁以上，抗A或抗B仍小于1：4，应考虑ID
（3）血清抗链球菌溶血素抗体的测定
（抗 O）的测定—反应IgG水平
3岁以上应大于100单位
2. 确诊试验
（1）血清Ig（IgG、M、A）测定：采用 免疫比浊法：若IgG小于2.5gL、IgA缺乏、IgM
小于0.2gL，可确诊为无丙球蛋白血症
（2）特异性Ab产生能力测定：三联伤寒菌苗试验：正常人注射0.25ml，每周1次，连续3次，抗H应为1：160，若低于1：40，表示体液免疫功能差

（3）B细胞计数：SmIg检测
免疫荧光法，正常15％左右
（4）T细胞亚群测定：CD4CD8(ThTs)
正常(1－3.5)1，若小于0.5，可确诊为
AIDS

34.怀疑细胞免疫缺陷应作哪些过筛试验和确诊试验？
1. 过筛试验
（1）淋巴细胞绝对值测定：正常大于2.5×109L， 若 小于1.5×109L 为缺乏
（2）迟发型超敏反应皮肤试验 ： OT皮试等
（3）胸腺X线检查：观察胸骨是否发育不全
2. 确诊试验
（1）T淋巴细胞计数及其亚群检测：
E花环实验: 正常Et 60－70％
免疫荧光法：CD3+TLC、CD4+TLC、CD8+ TLC 计数
（3）T细胞功能体外试验：
PHA刺激的淋巴细胞转化试验：正常60－70％

-I、II类分子的结构、分布及意义。

HLA-I 类
结构
由一条链和一条链组成，
链的N端胞外区分为1、2、3
三个结构区，其中1 、2构成抗
原结合槽，与处理后的抗原肽结
合形成MHC-抗原肽复合体
由一条 链和一条链组成，两
条肽链的胞外区分别有1、2和
1、2两个功能区，由1与 1
共同形成抗原结合槽
分布
所有有核细胞
膜上
意义
1.识别和提呈内源性抗原肽
2.对CTL的识别起限制性作
用
3．TCR—抗原肽; TCR —
MHC-I
1.识别和提呈外源性抗原肽
2.对Th的识别起限制性作
用
—抗原肽;
TCR—MHC-II
HLA-II类 抗原提呈细胞
(如B细胞、巨
噬细胞、树突状
细胞)及活化的
T细胞等

36．移植排斥反应的类型及产生的原因和避免方法。
1.超急性排斥反应
原因：受者体内预存有抗供体细胞的抗体（针对HLA），抗体与供体细胞的HLA Ag结合，
激活补体，细胞破坏；补体活化产物使血小板凝聚，释放凝血因子XⅡ，产生血管内凝血 < br>避免方法：移植前取受体血清与供体细胞进行细胞毒试CDC试验，检测受者血清中是否预
存有抗 供体细胞的抗体。
2.急性排斥反应
原因：供、受者HLA Ag型别不完全一致早期以细 胞免疫为主（CTL直接杀伤、活化的Th1
介导的迟发型超敏反应）晚期体液免疫为主（抗体介导的细 胞毒作用，NK）
避免方法：尽可能选择HLA Ag型别一致的供体
3.慢性排斥反应
机理：供、受者HLA Ag型别不完全一致体液免疫为主（ Ⅳ型超敏反应引起的免疫损
伤； 特异性Ab活化补体及通过ADCC作用破坏血管内皮细胞；急性排斥反应引起的退

行性 病变等）
避免方法：尽可能选择HLA Ag型别一致的供体

37.移植物抗宿主反应的概念及产生原因。
在骨髓移植时，由于移植的骨髓也含有丰富的免 疫细胞，且受体处于严重的免疫抑制状态，
因而对供体骨髓表现免疫无能，以使供者骨髓中的免疫细胞不 仅得以生长，而且以受者细胞
卫康元产生免疫应答，引起攻击者的移植物抗宿主反应。
产生原因：
（1)供、受者HLA Ag型别不完全一致
（2）移植物中含有大量的免疫活性细胞，尤其是TLC
（3）受体免疫活性细胞处于反应无能状态
38.移植前选择供体应做哪些检测？
（一）交叉配合试验（P345）
1.预存抗体检测—检测测受体血清中有无抗供体细胞的抗体
（1）补体依赖的细胞毒试验（complement dependent cytotoxicity,CDC 试验)
检测方法：受体血清+供体Lc＋补体
→
观察细胞死亡情况，大于10%应放弃此供体
2.淋巴细胞交叉配合 受者LC+供者LC
→
观察二者LC的增殖转化程度
（二）HLA型别检测（P341) 血清学方法、细胞分型法

39.血清学与细胞学鉴定HLA抗原的基因位点是哪些，检测时应采用什么细胞？

血清学鉴定
细胞学鉴定
检测位点
A、B、C、DR、DQ
DP
细胞
检测A、B、C位点 —用总淋巴细胞
检测 DR、DQ 位点— 用B淋巴细胞
BLC

40.举例解释CDC试验。

41.移植后监测排斥反应应做哪些检测？
（1）T 细胞功能检测—3H-TdR四小时掺入法
（2）外周血T细胞及其亚群检测
采用免疫荧光法进行外周血T细胞计数；
采用流式细胞仪检测CD4+CD8+ ，原来低，现在升高，＞1.2，预示急性排斥反应发
生；＜ 1.08，提示感染的可能
（3）补体水平测定
在排斥反应时，补体成分消耗增加，导致血清中C3的减少。
（4）特异性抗体水平检测：ABO血型及抗HLA抗体等的检测

42.疫学检测质控的内在品质和外在因素各有哪些？如何进行衡量？
• 内在品质：精密度、准确度、敏感性、特异性等
• 外在因素：试剂、器材、参考品、操作人员等 < br>（1）精密度（precision）：用某种方法对同一标本反复测定，所得结果之间的差异大小，即< br>彼此之间的符合程度。包括批内精密度和批间精密度。用标准差（SD）和变异系数（CV）
来衡 量其大小。
（2）准确度（accuracy）：测定值和真实值之间的符合程度。

可用回收试验、与决定方法测定结果比较、与参考实验室的测定结果比较、与正常参考 值
范围比较等来衡量其大小。
（3）敏感性（sensitivity）：测定方法检测极低 浓度物质的能力；标本的真实状态为阳性，
用该方法检测能得到阳性结果。
衡量方法：
①将参考品作系列稀释，观察该方法所能测定的最低含量；
②检测临床已确诊的病例。
（4）特异性（specificity）：标本真实状态为阴性，用该方 法测定能得到阴性结果；无交叉
反应。
衡量方法：
①检测正常人群或已知的无关病例；
②已知的阳性标本，加入免疫阻断剂后是否得到阴性结果。