计算杀灭对数值的时候
-
计算杀灭对数值的时候，
取小数点后两位值，
可
以进行数字修约。
如果消毒试验组消毒处理
后平均生产菌落数小
于等于
1
时，
其杀灭对数值，
即大于等于试验前对照组平均活菌浓度的
对数值。
（
6
）
有机干扰物质：按
30g
牛血清白蛋白中加入
< br>1000ml
蒸馏水的比例配制约
100ml
，溶解
后用
0.45um
的无菌滤膜进行过滤除菌后使用，未用完的可于
2-8
℃冰箱中
保存。
（
1
）菌试验组：取无菌大试管加入
0.5ml
菌悬液，再加入
0.5ml
的有机干扰物质，分别
用无菌吸管吸取
0.2%
的新洁尔灭消毒液
4.0ml
，
加入试管中，
迅速混匀并立即计时。
待试验
菌与
0.2%
的新洁尔灭消毒液相互作用
2.5min
时，吸取
0.5ml
试验菌与消毒剂的混合
液，加
于
4.5ml
经灭菌的
0.1M
硫代硫酸钠
-
生理盐水溶液中，
混匀。
试验菌与消毒剂混合液经硫代
硫酸钠
-
生理盐水溶液作用
10min
后，吸取
1.0ml
样
液，按活菌培养计数测定方法测定存活
菌数，每管样液接种
2<
/p>
个平皿即可。如果菌液浓度较高时，可进行
10
< br>倍系列稀释后，在进
行活菌培养计数，作为试验组，其计数结果为
CX
。
（
2
）阳性对照组：用
4.
0ml
磷酸盐缓冲液代替
4.0ml0.2%
< br>的新洁尔灭消毒液与
0.5ml
菌
悬液、
0.5ml
有机干扰物质混合
2.5min
后，取
0.5ml
混合液
与
4.5ml 0.1M
硫代硫酸钠
-
生
理盐水溶液反应，作用
10min<
/p>
后。计数方法同试验组，计数结果为
C0
。
（
3
）阴性对照组：吸取此次试验用的纯化水
0.5ml
、
0.5ml
有机干扰
物质、
4.0ml
磷酸盐
缓冲液混匀，
混匀后取
0.5ml
混合液与
4.5ml0.1M
硫代硫酸钠
-
生理盐水溶液作用
10min
后，
< br>吸取
1.0ml
混合液，按活菌培养计数测定方法测定存
活菌数，作为阴性对照。
（
4
）
培养：
所有用细菌试验的样品均放入
30-35
℃
培养箱中培养，
培养
48
小时观察结果
；
用真菌试验的样品放入
23-28
℃
培养箱中培养，培养
72
小时观察结果。
4
、讨论
4.1
由结果可以看出通过中和剂中和效果试验可以确定，每升
PBS
缓冲液中加入
10g
组氨酸、
50ml
吐温
-80
、
5g
卵磷脂可以中和新洁尔灭消毒液的消毒效果，因此，在日常消毒
中应该避免以上物质的混入。
4.2
由消毒剂定量悬浮试验结果
可以得出新洁尔灭消毒液能够在
10
分钟内使所有试验
菌的数量至少下降
99.99%
，说明该消毒剂
的消毒效果能达到要求，能够用于使用环境日常
的清洁消毒。
5.6
消毒剂对物体表面消毒效果验证
5.6.1
消毒剂对物体表面模拟现
场鉴定试验
车间用于该消毒剂消毒
的物体表面主要有不锈钢设备表面、
地面、
墙面以及呼吸袋，<
/p>
经过小
试，将高浓度菌液（
>104cf
u/ml
）涂抹于不锈钢设备表面、地面、墙面及呼吸袋，选择回收
率较高的载体作为物体表面消毒效果试验室部分的试验载体。判断标准：回收菌液浓
度：
>103cfu/ml
。
（
1
）试验
所需要用的试剂
中和剂：活菌计数
用培养基：
TSA
培养基
消毒剂配制用水：纯化水
（
2
）试验所需要用的仪器
刻度吸管、移液器、电动混匀器、计时器、培养箱、规
格板（用不锈钢材料制备，中央留一
5.0cm
×
5.0cm
的空格作为采样部位）
、无菌棉签、无菌接种环
（
3
）试验所需要用的菌种
本次试验主要是验证该消毒剂对物体表面微生物的消毒效果，
故选择金黄色葡萄球菌、
大肠
埃希菌作
为试验菌
（
4
）试验所需要用的消毒液的浓度及作用时间
0.2%
的新洁尔灭消毒液作用
30s
（
5
）试验
所需要用到的场所
微生物实验室阳性间
（
6
）试验的操作步骤（以浓度为
< br>0.2%
的消毒剂对金黄色葡萄球菌作用
30s
为例）
菌悬液：浓
度为
5
×
105cfu/ml-5
×
106cfu/ml
试验组：
取大小合适的无菌呼吸袋作为试验样本，
将无
菌规格板按压在样本上，
用无菌棉签
沾以菌悬液均匀涂抹被试验
表面的
6
区块（各区块
25cm2
）
。用
0.2%
的
消毒剂对三个区块表
面进行喷雾消毒，喷雾的距离约为
10cm
，以尽量使喷到样本上的雾粒大小和数量一致，消
毒后，
将无菌棉签在
5ml
的中和剂试管中沾湿，<
/p>
分别对
3
个消毒区块进行涂抹采样，
每区块
横竖往返各
8
次。采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂试管中，电动混匀器上混匀
20s
，吸取
1.0ml
上述洗液，按活菌培养计
数方法测定存活菌数，每管接种
2
个平皿，作为
试验组，必要时进行稀释。
阳性对照组：
从
6
个区块中选取其他
3
个区块，
用磷酸盐缓冲液代替消毒剂
对三个区块表面
同法操作，
之后将无菌棉签在
< br>5ml
的中和剂试管中沾湿，
分别对
3
个区块进行涂抹采样，
每
区块横
竖往返各
8
次。采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂中，
电动混匀器上混匀
20s
，吸取
1.0
ml
上述洗液，按活菌培养计数法测定存活菌数，每管接种
2<
/p>
个平皿，作为阳