模式动物
陈思成老婆-
基因打靶常用小鼠模型
(
1
)完全性基因敲除小鼠(
Conventionai
Knockout
,
KO
)
完全性基因敲除是通过基因敲除技术,
把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外
显子或者功能区域敲除掉,
获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。<
/p>
应用:
用于研究某个基因(要求该基因非胚胎致死性基因)对全身
生理病理的功能。
(
2
)条件性基因敲除小鼠(
Conditional
Knockout
,
CKO
)
条件性基因敲除是通过基因敲除把两个
loxp
位点放到目的基
因一个或几个重要的外显子的两端制备出
floxed
小鼠,<
/p>
该
floxed
小鼠在与表达
Cre
酶小鼠杂交之前,
该目的基
因表达完全正常,而当该
floxed
小鼠与组织特异性表达
Cre
酶的小鼠进行杂交后,
可以在特定的组织或细胞中敲除该基因,而该基因在其它组织或细胞表达正常。
应用:
用于具有胚胎致死性目的基因的研究;用于研究基因在特
定的组织或细胞中的生理病理功能;与控制
Cre
或
Flp
表达的其它诱导系统相结合,还可以对某一基因的表达
同时实现在时间和空间两方面的调控。
(
3
)基因敲入小鼠(
Knockin
,
KI
)
基因敲入可以在目的基因位置引进特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变
(
模拟人类遗传疾病模型
)
;或将报
告基因
(
如
EGFP
< br>,
mRFP
,
mCherry<
/p>
,
mYFP
,或
LacZ
等
)
通过同源重组的方式引入
目的基因的特定位点,从而可以通过报告基因的表达跟踪目标基因的表达。通过报告基因的表达可以研究基因的表
达谱。也可以用报告基因取代小
鼠本身的基因,使
KO/KI<
/p>
同时发生。
应用:
用于药物筛选相关研究;用于信号通路的研究;用于示踪的相关研究。