血液凝集实验报告
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血液凝集实验报告
篇一：直接凝集反应实验报告
免疫学·直接凝集反应实验报告
实验一：玻片凝集实验
1.实验原理：
颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应的抗
体结合，在适量电解质（通
常是0.85%nacl）存在的条件下出现凝集现象，称为凝集反应。凝集
反应的方法有两种：①直接法；②间接法。颗粒性抗原（如完整的细
菌或细胞）与相应抗体在体
外直接结合而出现的凝集反应，称为直接
凝集反应。如玻片凝集反应和试管凝集反应。将可溶性抗原预先
吸附
于一种与免疫无关的颗粒性载体表面，然后与相应的抗体结合，出现
凝集现象，称为间接凝
集反应。如RF因子检测
玻片凝集试验是使用已知抗体与未知颗粒性抗原在玻片上直接结合
而
出现的凝集反应。此类反应较简单迅速，常用于抗原或抗体的定性
检测。
本次实验使用玻片凝
集试验的原理进行人类aBo血型的鉴定。aBo血
型系统是按照血液中红细胞表面的抗原分子来命名的
。人类aBo血型
抗原有两种：a抗原和B抗原。a型血红细胞表面具有a型抗原，血
液中具有
抗B抗体；B型血红细胞表面具有B型抗原，血液中具有
抗a抗体；aB型血红细胞表面具有a抗原和B
抗原，血液中不具有
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抗a、B抗体；o型血红
细胞表面不具有a、B抗体，但血液中含有抗
a、B抗体。若用已知的抗a血清和抗B血清与受试者红细
胞上的相
应抗原结合，即可引起红细胞凝集，根据凝集反应结果便可判断出受
试者的血型。
2.实验方法：
（1）取洁净载玻片一张，用马克笔分为两格并注明a、B分区。
（2）倒置标准抗血清试剂瓶，悬空轻挤出抗a血清一滴，滴在a区
内；同法在B区内滴加抗B血清一滴
。
（3）使用消毒液对左手无名指进行消毒，待消毒液自然干燥后，使
用无菌三棱采血针快速
刺破手指。
（4）用木棒的两端取血，分别在抗a血清和抗B血清中搅拌均匀。
（5）用无菌棉棒压迫手指止血。
（6）静置玻片数分钟后，观察红细胞凝集反应结果。
3.实验结果：
4.结果分析：
实验二：试管凝集实验
1.实验原理：
试管凝集反应是在试管内将待检血清对倍稀释后，加入等量的已知颗
粒性抗原与待检血清混合，
然后观察试管内有无凝集快出现。如出现
凝集块者为阳性反应。混合后仍均匀浑浊，无凝集块出现者为阴
性反
应。根据血清凝集效价判定待检血清中相应抗体的含量。即在试管内
用已知颗粒性抗原检测
未知抗体的相对含量的半定量试验。本次实验
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是以定量的伤寒杆菌为抗原，根据是否发生凝集反
应来检测血清中是否含有对应的抗体；根据各试管凝集程度的不同，
来判断抗体的效价。
2.实验方法：
（1）取试管6支，用马克笔进行标记，依次放入试管架中。
（2
）在第一支试管中加入生理盐水0.9ml，其余各管加生理盐水
0.5ml。然后在第一只试管中加入
伤寒免疫血清0.1ml，用吸管将它与
生理盐水吹打混匀后，取出0.5ml加入第二支试管中；再将
第二只试
管的液体吹打混匀，取出0.5ml加入到第三支试管中，其余各管依次
按照上述步骤
将血清对倍稀释。至第五支试管时，将试剂混匀后，取
出0.5ml弃之不用。是第六支试管不含伤寒免
疫血清，作为实验的阴
性对照管。最后在各管中都加入0.5ml伤寒杆菌菌液。
（3）轻摇试管架，混匀试管内液体，56℃水浴1小时后，观察实验
结果。
3.实验结果：
（1）对照组：即第六支试管，上清液浑浊，管底可有沉淀的细菌，
轻摇后分散呈均匀浑浊。
（2）实验组：按1-5管依次观察。阳性者管底出现不规则凝集物，
较松散。阴性者与对照组
相同。
（3）凝集程度：
++++：液体澄清透明，细菌全部凝集于管底，轻摇可见大的凝
集块。
+++：液体稍浑，细菌大多数凝集于管底，摇动后凝块较前者小。++：
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液体中等混浊，液体中有明显的凝集物，凝集块较小。+：液体混浊
，
仔细观察可以看见液体中有很小的凝集颗粒。-：与对照管相同。
（4）凝集效价：出现明显可见凝集物（++）时的血清最高稀释度为
血清效价。
篇二：细胞凝集胞实验报告
实验1.血细胞凝集
ellagglutination
摘要：细胞凝集指的是细胞与细胞之间通过某种凝集素的
作用而相互
粘连在一起的现象，最终形成大的细胞团块。而凝集素由于可使细胞
凝集而成为一种
重要实验和临床试剂。本次实验就是通过进行对兔血
细胞的凝集操作，观察细胞凝集现象，并掌握凝集素
促进细胞凝集的
实验原理和操作方法。
关键词：细胞凝集、凝集素
前言：凝集素是
一类能专一识别糖并与之非共价可逆结合的非酶非抗
体蛋白质。凝集素是指从各种植物、无脊椎动物和高
等动物中提纯的
糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红细胞，故名凝集素。凝集素按
来源可分为
植物凝集素、动物凝集素和微生物凝集素三大类;植物凝
集素分为7个家族：豆科凝集素、几丁质结合凝
集素、单子叶甘露糖
结合凝集素、2型核糖体失活蛋白、木菠萝素家族、葫芦科韧皮部凝
集素和
苋科凝集素；动物凝集素按分子结构分为c-型凝集素、S-型凝
集素、P-型凝集素、i-型凝集素等
。在细胞表面，组成细胞膜的糖脂
和糖蛋白伸出的寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。凝集素能与<
/p>
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细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。
其反应机制如下图：
凝集素在生化、医学等方面有广泛的应用：
1.凝集素在实验室中经常被用来分离、纯化蛋白
质植物凝集素的功能
是结合细胞表面上的糖蛋白，动物凝集素的功能包括结合可溶性的细
胞外或
细胞内糖蛋白。凝集素在实验室中经常用来分离、纯化糖蛋白。
这是由于植物凝集素能专一性地、非共价
地可逆结合糖蛋白中不同类
型的糖链结构，所以首先分别用凝集素亲和层析方法分离富集正常细
胞和癌细胞的细胞裂解液中的糖蛋白，从细胞裂解物中高通量的分离
出n-糖苷键型糖蛋白之后，再利用
双向凝胶电泳技术对于被凝集素吸
附的糖蛋白进行分离，最后利用质谱技术进行鉴定。
2.凝
集素介导细胞与细胞、细胞与基质的粘附选凝素是一类ca2+依赖
的、能与特异糖基识别并结合的细胞
粘附分子，主要介导白细胞与血
管内皮细胞或血小板的识别和粘附。选凝素n-末端凝集素结构域可识<
br>别特异的寡糖基，是选凝素参与细胞间选择性粘附的重要活性部位。
选凝素c-末端胞内结构域可
通过锚定蛋白与细胞内微丝结合，促进细
胞粘附。通过这种粘附介导白细胞从血液迁移至组织内。
3.凝集素检测肿瘤细胞的细胞膜上的糖基化改变
肿瘤细胞膜上组分的改变，较重
要的是糖蛋白及糖脂结构的改变，可用凝集素检测出来。大量研究发
现，凝集素可作为肿瘤特异性诊断的
标志和不同肿瘤的分化标记。凝
集素还可以作为探针，监测肿瘤细胞的细胞膜上的糖基化改变，作为
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多种癌症检测的参考指标。
4.外源凝
集素具有促有丝分裂原作用许多植物凝集素可作为有丝分
裂原，如PHa、cona和美洲商陆凝集素，
在免疫学中广泛用于刺激淋
巴细胞的增殖。在临床上常用PHa来刺激人外周血的T细胞，观察T
细胞增殖的程度，称为淋巴细胞转化试验，是一种细胞免疫功能的体
外检测方法。
5.纯化
的凝集素能够用来鉴定血型通常所说的血型就是红细胞的血
型，是根据红细胞表面的抗原特异性来确定的
。在人类的血浆（或血
清）中含有凝集素（又称抗体）
a、B。同名的抗原和凝集
素相遇会发生红细胞凝集现象。所以在人体
的血液中，所含的凝集原和凝集素的类型不同，可分为a、B
、aB、o
四种血型。纯化的凝集素能用来鉴定血型。
材料和方法：
试剂：
?PBS缓冲液（pH=7.2）
?土豆
?2%兔血红细胞悬液
工具、仪器：
?移液管
?载玻片
?显微镜
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?离心机、离心管（本次实验并未用到）
方法：
?土豆切片后，取2g放入10mlPBS溶液中浸泡2小时。土豆凝集素
将
会溶解于溶液中。（实验前已准备好了）
?梯度稀释制备不同浓度（1X，0.5X和0X）的土豆凝集素悬液
?取用抗凝血剂处理过
的1ml的兔静脉血，加3ml的生理盐水，
1000rmin离心5min，弃上清。（实验前也已准
备好了）
?将细胞沉淀悬浮于4ml生理盐水（注意不是PBS溶液），制成2%细
胞悬液。
通过系列稀释，将血细胞制成3种不同浓度（0.5%，1%和
2%）的悬液。
?按照如下表
一所示，用移液管取一滴凝集素或PBS溶液于载玻片凹
坑内，加上一滴红细胞悬液，漩摇混合。10m
in后于显微镜下观察。
表一?各组中凝集素和血细胞的浓度
图1.在载玻片上所观察到的各组血细胞凝集现象
图2.显微镜下细胞凝集形态（10x10）
实验结果描述：
总结结论:
1.土豆凝集素可以使血红细胞凝集，而且在红细胞浓度一定的情况
下，凝集素浓度与凝集程度和凝集
速度呈正相关。
2.由a-3、B-3、c-3可以得，PBS对血红细胞没有凝集作用。
3.由于时间与土豆凝集素没有明显关联，且凝集程度相似，所以当凝
集素浓度一定的情况下，无法对土
豆凝集素浓度和凝集程度和凝集速
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度的相关性进行判断。
补充实验：漩摇对细胞凝集的影响
方法：取B-1和B-2
进行实验，记为B-1’和B-2’，不对其进行漩摇，
静置10min其他
步骤相同。
结果：
结论：不进行漩摇，血细胞依然可以进行凝集，但由图可以看出进行
漩摇的一
组凝集程度更好。根据实验书所述，若不进行漩摇，所要进
行的操作是“静置20min”，也可以看出
漩摇的效果更好，但静置20min
和漩摇10min所达到的效果是否相同，由于没有进行实验，因此
还有
待考究。
讨论：
1.从实验结果上看，此次实验还是比较成功的，从血细胞凝集的宏观
和微观两方面观
察，都可以得到预期的结果，这应该是规范操作的结果。
2.这次实验也存在一定的瑕疵，首先是观察到的现象和时间的错乱，
a-1两次的记录的 <
br>时间()相差也比较大，也没有进行进一步的实验验证，我也无法得出
在土豆凝集素浓度及其他客
观因素相同的条件下，血细胞浓度与凝集
反应速率的相关关系。血细胞浓度与凝集反应速率这两者的关系
，这
是本次实验遗留下来的问题。原因有以下3点：一是用秒表计时，来
回记录时间上会有误差
，但也不会相差太大；二是不同的组员所进行