实验报告(20200623003340)

余年寄山水
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2020年08月15日 18:57
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免疫检验技术
实践报告
实践一直接凝集试验
一、玻片凝集试验((细困鉴定)
(一)实验目的
1, 学会细菌玻片凝集试验的操作和结果判断。
2, 理解抗原抗体反应的特异性,能做出正确的检验报告。
(二) 实验原理
玻片凝集试验是用已知的诊断血清,
集,可确定被检细菌的种属或型别。
(三) 实验材料
1,待检细菌:
2,试剂:诊断血清:
3,器材:玻片、接种环、酒精灯
四)实验结果记录
反应物

与被检的未知细菌进行凝集试验, 如出现特异性凝
反应现象
(凝集或不凝集)
结果判断
(阳性或阴性)
(五)实验报告


(六)实验讨论
1, 志贺菌抗体与伤寒沙门菌能发生凝集吗?为什么?
2, 做玻片凝集试验时,应怎样操作才能使凝集现象明显,利于结果的判断?
报告者: 报告日期:
、试管凝集试验(肥达反应常量法)
(一) 实验目的
1, 学会试管直接凝集试验的操作方法,熟练使用吸量管移液并进行连续二倍稀释。
2, 能够正确进行首管血清喜事度的计算。
3, 能够准确判断试管凝集试验的各级凝集程度和凝集效价,并准确报告结果。
(二) 实验原理
肥达试验是用伤寒沙门菌的 H (鞭毛)和0 (菌体)以及甲型(A)、乙型(B)副伤寒 沙门菌的诊断菌液与病
人血清做凝集试验,对伤寒、副伤寒作辅助诊断。如果需要,有些地 区可增加丙型(C)副伤寒沙门菌等其他沙门菌的
诊断菌液。
(三) 实验材料
1, 诊断菌液
2, 待检血清
3, 器材:小试管、刻度吸管、试管架等
(四) 实验结果记录
试吕号
血清最终稀释度1
TO菌液反应现象


1

2

3

4

5

6

对照管

TH菌液反应现象
PA菌液反应现象1


PB菌液反应现象
*反应现象分别以一、

(五)实验报告
+、++、+++、++++表示。
(六)实验讨论
1, 如何进行血清的连续二倍稀释?
2


2, 如果首管血清要求是 1: 15稀释,稀释
3ml,应该如何进行稀释?

试管直接凝集反应,是稀释抗原还是稀释抗体?为什么?
应如何观察试管凝集反应的结果?
3
报告者:报告日期:
后的总液量是
3,
4,


、大孔反应板法(肥达反应微量法)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三) 实验材料
1,待检血清
2, 试剂:
3, 器材:大孔反应板、吸量管、盖玻板
(四) 实验结果记录
孔号
1 2 3 4 5 6 7
生理 盐水 阳性 血清
对照

对照
血清最终稀释度

TO菌液反应现象

TH菌液反应现象

PA菌液反应现象

PB菌液反应现象

PC菌液反应现象
*反应现象分别以一、

+、++、+++、++++表示。
(五)实验报告
(六)实验讨论
报告者: 报告日期:
实践二 环状沉淀试验(CRP检测)
(一) 实验目的
4


(二) 实验原理
(三) 实验材料
1, 肺炎球菌
C
多糖(诊断试剂)
2, 待检血清
3,小试管、毛细滴管、试管架等。
(四) 实验结果记录
反应物
待检血清+C多糖诊断试剂 :
待检血清+生理盐水


实验管

对照管

(五)实验报告
(六)实验讨论
应怎样进行环状沉淀试验的结果观察?
报告者: 报告日期:
实践三免疫比浊测定法(IgG定量测定)
(一) 实验目的
熟悉免疫比浊测定法的原理、方法及结果判断。
(二) 实验原理
本试验以透射比浊法检测人血清 IgG。在反应系统中保持抗 IgG (抗体)过量时,所形
成的免疫复合物与IgG (抗原)的量呈正相关,而形成的浊度与入射光的衰减呈正相关,测 定吸光度A值可反映液相中
的IgG量。通过参照标准曲线得知待测血清红
(三) 实验材料
1,待检血清、标准血清、人 IgG参考品
IgG含量。
5


2, 聚乙二醇-氟化钠溶液
3, 其他试剂:羊抗人IgG抗血清、生理盐水、蒸馏水等
4,器材:分光光度计 721、水浴箱、微量移液器、刻度吸管、试管等
(四) 操作方法
1, 系列参考管用生理盐水稀释人 IgG参考标准品,使其浓度分别为 5.5gL、11.0 gL、 22.0 gL、44.0 gL
(浓度可根据不同制剂变动)。取上述IgG参考标准液各10卩I分放于4 个试管中;另取生理盐水 10卩I,放于第5
支试管中,作为空白对照。分别做好标记。
2, 血清测定管将待检血清和标准血清均做 1: 10稀释
(0.1ml待检标准血清+0.9ml生 理盐水),混匀。各取10卩I分放于预先标记的试管中。
3, 抗体准备用PEG- NaF溶液稀释羊抗人IgG抗血清(按商品效价稀释)。
4,
准管、待测管中分别加入稀释抗血清
混匀后置37
C
水浴30分钟。
5,
340nm波长,用生理盐水空白管校正零点。
比浊用分光光度计进行测定,
逐次
A值。
使用
抗原抗体反应向上述参考管、
1.0ml,
空白管、标
测定各参考管、标准管和待测管,准确读取和记录各自的
(五)实验结果记录

1
参考标准品1:
10
参考标准品1:
16
参考标准品1:
20




2

3

4

5

6

7
10卩l

10卩l

10卩l

参考标准品1:
32

10卩l

待检血清
(1 : 10)

10卩l

标准血清
(1 : 10)

10卩l
生理盐水
PEG-羊抗人IgG

10卩l
1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml
340nm 波长
(
A)
六)实验报告
七)实验讨论
6


报告者: 报告日期:
实践四 单向琼脂扩散试验 (IgG 定量检测)
一)实验目的
二)实验原理
(三)实验材料
1,1.0%琼脂凝胶
2,参考血清:
3,特异性抗血清:
4,待检血清
5,其他:载玻片、三角烧杯、试管、移液管、微量加样器、有盖搪瓷盘、打孔器、温 箱等。
(四)实验结果记录

标准1
直径(mm)


标准2

标准3

标准4

标准5

测定
绘制标准曲线:
(五)实验报告
(六)实验讨论
7


报告者: 报告日期:
8


实践五 双向琼脂扩散试验、对流电泳
、双向琼脂扩散试验
一)实验目的
二)实验原理
(三)实验材料
1,1%琼脂
2,待测抗原(抗体) 、已知抗体(抗原)
3,其他物品:载玻片、打孔器、带盖搪瓷盘、滴管等
(四)实验结果记录
五)实验报告
六)实验讨论
、对流电泳
(一)实验目的
(二)实验原理
(三) 实验材料
1, 缓冲液PH8.6醋酸-巴比妥钠
2, 1%琼脂
3, 抗体:
4, 抗原:
5, 电泳仪、打孔器、载玻片、加样器等
(四) 实验结果记录
9
报告者
报告日期:


结果


电泳时电压



电泳时间
(五)实验报告
(六)实验讨论
一)实验目的
二)实验原理
(三)实验材料
1,试剂盒
2,待检血清
3,酶联仪
(四)实验结果记录
阳性对照 阴性对照

实践六 酶联免疫吸附试验
ELISA
夹心法测
HBsAg
10
待检血清

报告者 报告日期:




五)实验报告
(六)实验讨论
1,试验过程中,洗涤的目的是什么?
2, ELISA 阳性有何临床意义?
实践七 斑点金免疫层析技术检测 HCG
一)实验目的
二)实验原理
(三)实验材料
1,测试条
2,待检者尿液 (四)实验结果记录 对照线: 检测线:
(五)实验报告
(六)实验讨论 试分析以下结果: 1, 仅对照线呈红色。
2, 检测线、对照线均未呈红色。
11
报告者:
报告日期:


实践八中性粒细胞吞噬功能的检测
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,0.5%甘油
2,45.0gL NaCI
3,葡萄球菌菌液


四)
计数中性粒细胞总数
实验

结果记录
吞噬葡萄球菌的中性粒细胞数
吞噬率%=

(五)实验报告
(六)实验讨论
1,人体内的吞噬细胞有哪些?
3,中性粒细胞吞噬功能检测的注意事项是什么?
报告者:
报告日期:
12


实践九 血清总IgE的检测(ELISA法)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三) 实验材料
1, 试剂盒
2, 待检血清
(四) 实验结果记录
1,标准品检测结果记录
标准品浓度(Uml)

0

10

50

100
吸光度值(A)

根据标准品检测结果制备标准曲线。

2,待检血清检测结果记录
反应物

吸光度值

IgE浓度
待检血清

(五)实验报告
(六)实验讨论
1, 实验材料和操作方法对实验结果有何影响?
2, 说明实验结果的临床意义。
13


报告者: 报告日期:
实践十 抗链0试验(胶乳法)
(一) 实验目的
(二) 实验原理
(三) 实验材料
1, 抗链o检测试剂盒
2, 待检血清
(四) 实验结果记录
1,定性检测
反应物

反应现象
(凝集或不凝集)

结果判断
(阳性或阴性)

待检血清
2,半定量检测
稀释倍数
待检血清中ASO含量
(IUml)

1 : 2
400
1 : 4
800
1: 8
1600
检测结果
14


报告者:
告日期:


五)实验报告






(六)实验讨论


1,实验材料和操作方法对实验结果有何影响?

2,说明实验结果的临床意义。






































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