改善生长发育功能保健食品

绝世美人儿
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2021年02月13日 01:51
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-

2021年2月13日发(作者：已觉春心动)



第十五节



改善生长发育功能保健食品功效成分及检测方法



一、概述



儿童青少年时期是人体生长 发育的重要阶段，处于不断的生长发育过程中。


生长是指某一特定类型细胞的数目和大小 增加，


表现为身体大小的改变，


是一种


与身体高度和重量增加有关的现象。


发育表示组织和器官进行分化，

并获得其特


有的功能。生长与发育两者关系密切，不能截然分开，故一般统称为生长 发育。


生长发育不是简单的身体由小增大的过程，


而涉及到个体 细胞的增加分化、


器官


结构及功能的完善


[1]


。儿童时期生长发育迅速、代谢旺盛，因此必需保证有充足

的营养物质，满足其生长发育的需要。但由于儿童挑食、偏食的不良习惯


,


可能


引起营养素摄入不足，导致发育迟缓，而且在很大程度上影响其智力 发育。


针对


这种现象，开发了改善生长发育的保健食品。



目前我国改善生长发育的保健食品中，有很大一部分产品是营养 素补充剂


类。


国家食品药品监督管理局已批准具有改善生长发育 功能的常用原料有：


肌醇、


牛磺酸、锌和富锌物质、牛初乳、鸡 内金、铁、维生素


A


、维生素


D


、维生素


C


、


钙、牡 蛎。市场上出现的保健食品主要以补充钙、铁、锌、维生素等营养素类众


多。如葡萄糖酸 锌口服液，葡萄糖酸钙口服液，钙片、维生素


C


片、维生素


E


胶


囊，


复合维生 素片和多种维生素、


矿物质配合在一起的复合维生素矿物质类保健


食品等。


儿童青少年生长发育迟缓有遗传、膳食营养等多方面的因素。


而营养素


缺乏，


各种营养素的摄入不均衡，

< p>
膳食结构不合理等营养问题可能是发育迟缓的


主要原因。儿童的生长发育离 不开四大营养物质：蛋白质、矿物质（尤其是钙及


各种微量元素）


、脂肪酸（尤其是必需脂肪酸）以及维生素，适当补充这些营养


物质必不可少。



常见的改善生长发育功能的保健食品主要包括：高蛋白食品、维生 素强化


食品、赖氨酸食品、补钙食品、补锌食品、补铁食品、磷脂食品和


DHA


食品等。


其主要的功效成分为：


1


、氨基酸和蛋白质


（如糖蛋白、脂蛋白，

< p>
赖氨酸等）；


2


、


维生素 （如维生素


A


、维生素


D


、维生素


C


等）


；


3


、矿物质（如钙、铁、锌等）；


4

< p>
、磷脂（如卵磷脂）；


5


、脂肪酸（如

< p>
DHA,EPA


等）；


6


、生长因子


。




1



二、主要功效成分介绍



1


．组成、性质及生物学功能



（


1


）氨基酸和蛋白质



氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位。


含有一个 碱性氨基和一个


酸性羧基的有机化合物，氨基一般连在


α


-


碳上。氨基酸是制造精卵细胞的主体


物质，


是合成神经介质的不可缺少的前提物质；


氨基酸能够为机体和大 脑活动提


供能源，


氨基酸是一切生命之元。人体所需要的氨基酸 分非必需氨基酸


（指人自


己能由简单的前体合成，


不需要从食物中获得的氨基酸。


例如甘氨酸、


丙氨酸 等）


和必需氨基酸（人体自身无法合成，必须从食物中获得）。对成人来讲必需氨基


酸共有八种：赖氨酸、


色氨酸、苯丙氨酸、


蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、


缬氨酸。如果饮食中经常缺少上述氨基酸，可影响 健康。对婴儿来说，组氨酸也


是必需氨基酸。儿童在身体成长发育的关键阶段，为了健康 的成长，


需要补充必


须氨基酸。


我国市 场上，保健食品类的氨基酸制品主要以复合氨基酸口服液、复


合氨基酸胶囊和片剂为主< /p>


[2]


。改善生长发育的氨基酸保健品中主要功效成分是赖


氨酸、精氨酸、亮氨酸等。赖氨酸又称


L -


赖氨酸盐酸盐，是人体第一必需氨基


酸。它是人体所必需的营养物质，能提高智力、促进 生长、增强体质，帮助钙的


吸收，治疗防止骨质疏松症。缺少赖氨酸则会使孩子生长停滞 、反应淡漠、肌肉


松弛、


抵抗力降低等，


严重的还会影响智力发育。


精氨酸除了起免疫调节作用外，


还 刺激垂体分泌生长激素，


改善儿童生长。


亮氨酸作为一种肌肉蛋 白质合成的催


化剂，对生长发育非常的重要。


缺乏这种必需氨基 酸儿童生长受损，


无法解释的


体重下降或体重增加，碳水化合物 渴望和暴饮暴食等。



牛磺酸又称牛胆酸


,


其化学名称为< /p>


2-


氨基乙磺酸，


分子式为


C


2


H


7

< br>NO


3


S


，

化


学结构式为


H


2


N-CH


2


-CH


2


-SO


3


H


，相对分子 质量为


125.15


，牛磺酸在常温常压下

为无色四周针状结晶，无臭，味微酸，熔点


300


℃，溶于 乙酸，微溶于水，不溶


于无水乙醇、乙醚或丙酮，具有抗氧化功能，可用作润湿剂和生化 试剂。牛磺酸


是一种含硫的氨基酸，在体内以游离状态存在，不参与体内蛋白质的生物合 成。


主要维持人体机能的正常运作与平衡


,


维护各器官的生长发育


,


提高自身免疫


功能


,


对人体健康


,


特别是婴儿的正常发育 起着十分重要作用。


还能帮助钾，


钠，


钙、铁和锌在细胞内外的转运，


促进营养素的吸收。


由于牛磺酸 是人体必不可少


的氨基酸


,


当其在某种情况下出现不足时


,


将会引起人体生理机能异常。


如出现



2



视网膜功能紊乱，生长和智力发育迟缓等。


< br>（


1


）促进大脑发育、增强学习记忆能力



牛磺酸可促进脑细胞


DNA


、


RNA


的合成，增加膜的磷脂酰乙醇胺含量和脑


细胞对蛋白质的利用率，


从而促进脑细胞的结构和功能的发育。


牛磺酸通过提高


蛋白质的率用率可促进大白鼠的学习和记忆能力，

< p>
补充适量的牛磺酸不仅能提高


大白鼠学习记忆的速度，而且还可提高学习记 忆的准确性。



（


2

< br>）促进排铅功能



姚思宇


[1]


探讨天然牛磺酸是否具有排铅解毒的作用。


选用


SPF


级


Wistar


纯种< /p>


雄性大白鼠


55


只，按体重分为


5


组：牛磺酸高、中、低


3

个剂量组，空白对照


组，模型对照组，每组


11

< p>
只。实验开始后，模型对照组、受试样品各剂量组每


天饮用


1 g/L


乙酸铅水溶液造模的同时，牛磺酸高、中、低剂量组动物灌胃给予< /p>


纯牛磺酸


0.07mg/kg


、


0.14 mg/kg


、


0.21 mg/kg


，每天


1


次，连续

30d


；空白对照


组不造成高铅模式，灌胃蒸馏水，灌胃量 为


10ml/kg


，每天


1

< p>
次，连续


30d


，于


末次 给予受试药品


24h


后，


采用瞬间高压 直流电


550v


将大鼠电昏后处死，


取 血、


肝脏和股骨称重后进行湿式消化，


用石墨炉原子吸收分光光 度计测定铅含量。


结


果表明，血、肝脏、股骨中铅的含量表现为 是牛磺酸高、中、低剂量组均明显低


于模型对照组；模型对照组明显高于空白对照组。实 验结果表明：


天然牛磺酸具


有促进血铅排出，降低肝组织、股骨 内铅含量的作用。



（


3


）促进脂类物质消化吸收



牛磺酸能促进人体对脂类 物质的消化吸收，


并参与胆汁酸盐代谢。


牛磺酸在


肝脏中能与胆酸结合成牛磺胆酸，从而促进脂肪乳化，增加脂肪酸的活性，


并 协


助中性脂肪、胆固醇、脂溶性维生素及其他脂溶性物质的消化吸收。

< br>


牛磺酸为机体的内源性物质，


无抗原性，各种给药途径 均易吸收。有人曾用


饲料量的


5%


的牛 磺酸进行大剂量的动物饲养试验，未出现任何副作用。


FEMA


认可牛磺酸为


GRAS


物质。我国


GB


14880-1994


规定，牛磺酸可用于乳制品、

< p>
婴幼儿食品及谷类食品、


强化饮料，


使用量为


0.3 g/kg ~0.5g/kg


；


乳饮料为


0.1 g/kg


~0.5g/kg


。



蛋白质是机体的生命基础，各种组织器官都离不开它。人体的肌肉、骨骼、

< br>皮肤、血液等一切细胞组织都是由蛋白质组成的。蛋白质由


20

< br>种基本氨基酸组


成，不同种类的蛋白质由不同种类，不同数量的氨基酸组成。


蛋白质包括动物蛋



3



白和植物蛋白。动物蛋白主要来源于蛋、奶、肉、鱼等。它们 的氨基酸模式与人


体非常接近，我们把它们称作优质蛋白。植物蛋白主要来源于豆类及其 制品。


儿


童处在不断生长发育时期，


各 组织器官不断增长，


都需要蛋白质作为生长的原料。


儿童饮食中 蛋白质供应不足，


会直接影响孩子的生长发育，


严重时会出现发 育迟


缓、贫血、乏力、食欲不振及对疾病抵抗力差、智力低下。



(2)


维生素


维生素是人和动物为维持正常功能而必需从食物中获得的微量物质。


膳食中


缺乏一种或多种维生素可能导致生长或繁殖的衰退或特有的代谢紊乱，


严 重的情


况下，还会导致死亡。维生素以其溶解性不同，可分为两大类，一类是脂溶性维< /p>


生素，


它包括维生素


A

< br>、


维生素


D


、

< br>维生素


E


、


维生素


K


；


另一类为水溶性维生素，


它包括维生素


B


族、维生素


C


、生物素，胆碱、叶酸等。维生素的生理作用各不


相同，


相互间也不能相互替代。


其中以维生素


A

< p>
和维生素


D


对身高的影响最为直

< br>接，在生长发育过程中是不可缺少的成分之一，


尤其对胎儿、

婴幼儿的发育有重


要作用。


而其他维生素主要维护整个机体 健康状态，


如果不足会导致整个机体的


营养失调而影响到生长发 育。


脂溶性维生素中，


维生素


A


能帮助婴幼儿正常生长、


发育。另外





胡萝卜素，可在人体内也转化为维生素


A


。 缺乏维生素


A


，可发生


食欲下降，疲倦 ，腹泻，生长迟缓。维生素


D


是生长发育的必需维生素，它具有


帮助钙、磷吸收的功能。对婴幼儿骨骼极为重要。婴幼儿必须额外补充维生素

< p>
AD


，


才能保证婴幼儿的正常生长发育。维生素< /p>


D


缺乏时导致儿童佝偻病，


成人骨


质疏松。


维生素


K


等 也是骨骼矿化过程中的重要营养素。


维生素


E

< br>为生殖功能所


必需，


具有改善生长发育，


预防肌肉萎缩症等功能。


缺乏维生素


E


时，


皮肤粗糙，


缺少光泽，生长发育迟缓等。



水溶性维生素中，


维生素

B


1


能促进婴幼儿生长，


维持良好 的食欲及正常的肠


蠕动。缺乏时，容易疲倦，食欲不振，有时会腹泻及便秘。如泛酸（维 生素


B5


）


又称为遍多酸，它是构成辅 酶


A


的组成部分


,

在参与机体的糖、脂肪、蛋白质的


代谢过程中起着重耍的作用。泛酸缺乏时，临床上 表现为生长发育迟缓、胃肠机


能紊乱、胃肠炎、甚至发生溃疡。其它维生素


B


族（如


B


2


、


B


6


、

< br>B


12


、泛酸等）几


乎都是能量 代谢过程中辅酶的重要组成成分，


一旦发生缺乏或不足，


机体的 能量


代谢就会发生障碍，


影响各系统功能的正常运转，


同样也会因此而影响生长发育


的进行。维生素


C


促进骨骼的发育，参与细胞间质的形成，维持血管、牙齿的正



4



常生理功能。婴幼儿处于快速的 生长发育时期，


维持骨骼正常发育非常重要。维


生素

< p>
C


性质不稳定，


很容易被氧化。维生素

< p>
C


缺乏可导致牙齿缺陷，


尤其在婴儿


牙齿形成的时期危害更大。


叶酸是一种水溶性


B


族维生素，


对细胞的分裂生长及


核酸、氨基 酸、


蛋白质的合成起着重要的作用，


是胎儿生长发育不可缺少的 营养


素。此外，水溶性维生素还有生物碱，胆碱等都具有重要的生理功能。维生素类


似物肌醇也能促进细胞新陈代谢、改善生长发育。



(3)


矿物质


矿物质是人体的重要组成部分，


为维持生命活动所必需。


矿 物质又分常量元


素和微量元素两类。常量元素有钠、钾、钙、磷、镁、氯等，主要作用于 维持机


体的水电解质平衡，


维持身体运动和肌肉收缩，


提高神经细胞兴奋性和酶的活性


等。微量元素（体内含量＜


0.01%


）中最重要的有铁、碘、锌、硒、铜、铬、钴

等。


当从饮食中摄入的某种微量元素的量下降到低限值时，


可损伤某些重要生理


功能，


影响生长发育并引发相关疾病。


矿物质当中目前作为营养素强化剂或功效


成分的主要有钙，铁、锌、 硒、铬等。



钙是人体内含量最丰富的矿物质，不仅是构成人体 骨骼和牙齿的主要成分，


而且在神经冲动的传递、血液凝固、


细 胞粘着、


酶促反应的激活等一系列的生理


过程中，发挥极其重要 的作用


[3]


。根据


1992


年全国营养调查结果，全国平均每


标准每日摄入钙


405


mg,


仅达到


RDA


的


50%


左右


(


我国成人钙的


RDA


值为

< br>800


mg)


，


全国尤其是儿 童青少年和老年人缺钙比例很高


[4


]


。为了补充钙，补钙类保健食品


及补钙制品在国内外发展很快。目前国内市场有


100


多种补钙剂，以“活性钙”


为主。


从原料来源上可分为三类：


①传统沿用的化学钙，

如碳酸钙、


葡萄糖酸钙、


乳酸钙、柠檬酸钙等；②海洋生物 钙，如生牡蛎钙、煅解牡蛎钙、活性钙等，多


为


CaO


及


Ca(OH)


2


的混 合物；③其他钙制剂，如骨粉、蛋壳等。钙缺乏时，易患


小儿佝偻病，发育迟缓。铁是造 血的主要原料，参与血蛋白、细胞色素及各种酶


的合成，


促生长 。


人体缺铁会发生小细胞性贫血、


免疫功能下降和新陈代谢紊乱


等。锌是生长发育所必需的微量元素，是多种酶、核酸、蛋白质的组成成分，能


改善生长发育、促进组织再生。缺乏时，可使生长发育停滞，代谢障碍，性机能

< br>发育不全，


影响


DNA


和


RNA


聚合酶及蛋白质的生物合成。


缺锌儿童 的主要表现是：


生长发育迟缓；味觉减退、食欲降低、厌食；同时常发生皮肤溃疡和口腔 黏膜溃


疡，机体免疫力全面减弱。对较大年龄的儿童，则可引起生殖器官的发育不良，< /p>



5



第二性 征发育缺陷，智力发育迟滞等。大量研究还指出，


补锌对儿童的生长发育


（如身高和体重）有促进作用。



另外，磷、镁与钙有 类似作用，是构成骨骼架构的最基础元素。镁在人体新


陈代谢过程中承担了举足轻重的作 用，


是人体一切生物膜形成的重要物质。


镁缺

< br>乏时引起血管扩张、充血、心悸。磷构成骨胳、牙齿及软组织，调节能量释放，


构 成酶，参与物质活化，调节酸碱平衡。碘是维持甲状腺功能，合成甲状腺素不


可缺少的原 料，具有促进蛋白合成，活化多种酶，调节能量转换，加速生长发育


的作用。

< p>
缺碘可影响甲状腺素合成，


导致儿童克汀病、


智力 低下、


身体发育迟缓。


氟是骨骼、


牙齿 的结构成分，以氟化钙的形式存在，


对骨骼和牙齿的健康生长起


到重要作用。


缺氟可造成龋牙


（蛀牙）


。


铬能激活胰岛素，


参与糖和蛋白质代谢，

加速生长发育。硒与心血管结构关系密切，


在青春期突增阶段


（心血管功能的快


速增长期）尤其不可缺少。


钴是人体内维生 素和酶的重要组成部分，


其生理作用


是刺激造血，参与血红蛋白 的合成，


改善生长发育。


铜能协助机体对铁的吸收和

< p>
储备，促进体内生物氧化过程，具有造血、软化血管、促进细胞生长、壮骨骼的

作用。



(4)


磷脂



磷脂是构成生物膜的主要成分，


主要包括卵磷脂、溶血卵磷脂、


神经磷脂和

其他少量磷脂。其中卵磷脂最受人们重视。卵磷脂是由甘油、胆碱、磷酸、饱和


及不 饱和脂肪酸组成的一种含磷脂类物质，是磷脂酰胆碱


(PC)


、 磷脂酰乙醇胺


(PE)


、磷脂酰肌醇


( PI)


、鞘磷脂


(SM)


及其他磷脂的 总称，其中


PC


、


PE


、


PI


是卵


磷脂的重要组成成 分


(


尤其是


PC


，有文章直接将其称为卵磷脂


)


。较纯的卵磷脂


呈黄色或棕色蜡块状，不溶于水，溶于无水乙醇；与空气接触后颜色逐渐变深，


久贮后呈棕黑色，在空气及日光照射下，


易氧化分解变质。卵磷脂作为人体正常


新陈代谢和健康生存必不可少的物质，


在人体内能转化为乙酰胆碱，< /p>


它是神经细


胞之间传递信息的重要物质，


乙酰胆碱含量增加能使大脑神经触突迅速发达，


加


速大脑神经细 胞信息传递速度，有助于提高大脑细胞活性，增强记忆力。


卵磷脂


是人体细胞膜的主要组成部分，


对维护细胞的正常结构与功能、


促进细胞生长发


育有重要作用。早在


20

世纪


70


年代，美国就将卵磷脂用于保健食品，婴幼儿时< /p>


间是大脑形成发育的最关键时期，


补充足够的卵磷脂，

< p>
对于促进大脑神经系统与


脑容积的生长发育是非常重要的。卵磷脂缺乏时， 脑神经细胞代谢缓慢，


再生能



6



力降低。



(5)


脂肪酸


人体内大多数脂肪酸


（包括饱和脂肪酸和非饱和脂肪酸）


都 能够自身合成


（称


为非必需脂肪酸），但有些脂肪酸，如亚麻酸 和亚油酸人体则不能自身合成，只


能从日常饮食中获取，


如饮食 中缺乏或不足，


则会影响机体的功能甚至婴幼儿的


生长发育，< /p>


这些脂肪酸称为必需脂肪酸。


亚麻酸在体内分解成为二十二碳六烯 酸


（


DHA


）


和二十碳五烯酸


（


EPA


）

< p>
。


亚油酸在人体内可被转化成花生四烯酸


（


AA


）


。


DHA


是人体必需的长链多价不饱和脂肪酸，


它是构成细胞膜尤其是神经系 统细胞


膜和视网膜的重要组成成分，对婴幼儿大脑和视网膜的发育起着十分重要的作


用。缺乏


DHA


会使儿童生长发育迟缓，失 明，智力障碍。


EPA


具有调节血脂、软


化血管，降低血液粘度，改善视力、促进生长发育和提高人体免疫功能等作用。


缺乏< /p>


EPA


容易引起视力障碍，心脑血管疾病。


AA


也是一种多元不饱和脂肪酸，


是人体大脑和视神经发育的 重要物质，对提高智力和增强视敏度具有重要作用。


主要来源与


DHA


相同，均来自海产鱼类的鱼油。


AA

的缺乏对于人体组织器官的


发育，尤其是大脑和神经系统发育可能产生严重不良影响 。



(6)


生长因子



生长因子是具有刺激细胞生 长活性的细胞因子。


一类通过与特异的、


高亲和


的细胞膜受体结合，


调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。


自然


存在于体内


,


是内源性的


,


为生物生长、


发育所必需 的。


生长因子有多种如胰岛素


样生长因子（

IGF


）、表皮生长因子（


EGF


）、铬复合体、转移因子（


TGF


）等。


可促进身体内部的神经系统、纤维细胞、皮肤系统、内分泌新陈代谢、消化系统


等的生 长发育，并能调节血糖含量，帮助修复组织，修复细胞


DNA


及


RNA


，使新


生细胞增多，从而促进生 长发育，增强耐力和体力，延缓衰老。生长因子可从天


然物质中提取，如实验室菌类、鹿 茸精华素、海底植物精华素、人参皂甙等。牛


初乳、螺旋藻中含有大量的各种生长因子， 促进生长发育。避免了侏儒症、骨生


长异常、细胞分裂及增生异常、各内分泌生长异常等 。



2


、安全性（毒理）



对于一些食欲不佳或者有偏食、


挑食等不良饮食习惯的儿童青少年以及一些


已经发生了某种营养素缺乏症的患儿可适当选择此类保健食品。


市场 上补钙、


补


铁、


补锌等补充营养素类保 健品众多，


应选择儿童专用型或适合儿童服用的产品，



7



要求口味好、安全无毒、易吸收 。高蛋白质，虽然营养价值高，但吃的过多，也


会给机体带来了不利。首先，

< p>
蛋白质食入过多，


蛋白质的消化吸收过程增加了胃


肠、


肝等消化器官的负担，


引起消化不良、

腹胀、


腹泻、


食欲减退等胃道的反应，

这样，势必会影响进食和其它的营养素，


膳食中各种营养素之间出现不平衡。


此


外大量蛋白质的代谢产物如尿素氮、肌酐、尿酸等的增加，会加重肾 脏负担，同


时也可促使钙化素的排出量增多，


可引起肾脏损伤或 引起故质疏松。


氨基酸对儿


童的生长发育不可缺少，

< p>
但摄入过量反而会不利于儿童的成长。


摄入过多的氨基

酸，超过了儿童本身的消化吸收能力时就会出现厌食、大便干结等症状。食中含


有过 多亮氨酸还会增加体内氨的数量，并破坏肝，肾功能。因此，除非咨询过医


生，否则肝或 肾功能受损患者不应该采用大剂量的亮氨酸，这会导致病情恶化。


维生素是维持人的正常 生理功能所需要的营养物质，而且还有保健、防病、


治病


的功效 ，但与其它营养素相比，其需要量还有很少的，缺维生素会引起疾病，如


服用过多维生素 剂，对人体是有害的，


甚至会引起中毒。


如过多摄入维生素


A


可


以导致痉挛数量，胃的副作用，如腹泻 ，头痛，呕吐，头晕，皮疹等。维生素


D


补多了孩子会出汗多、 容易烦躁、睡眠不好，甚至还会引起中毒。应特别注意：


尽管许多微量元素是机体不可缺 少的，


但摄入过多同样有害。


如微量元素氟是骨


骼、牙齿的结构成分，但高氟可引起氟斑牙，导致骨发育迟缓，同时抑制


DNA


和


RNA


的合成，对脑发育产生不利影 响。补锌过量，则会影响铁、钙等的吸收和利


用。过量服用钙剂，孩子容易便秘、上火、 厌食；过量补充微量元素铁，则牙齿


会发黑、心口灼热、恶心、便秘或腹泻、上腹不适等 症状就会增加。另外，一些


保健品中很可能含有仿生长激素或是仿性激素，而花粉、蜂王 浆、


人参等的激素


含量也非常高，都不适宜给孩子吃。


儿童长期服用蜂王浆类的保健品，


可能导致


内分 泌失调和性早熟，甚至肥胖。


再有就是牛初乳等产品含有雌性激素，

如果长


期服用，也会刺激孩子们出现性早熟。



三、主要功效成分的检测方法综述



1.


蛋白质，氨基酸的检测方法


< /p>


目前保健品中蛋白质的测定方法主要有凯氏定氮法、


考马斯亮蓝法 、


Folin-


酚法、双缩脲比色法、电泳法、紫外分光光度法 、蛋白质自动分析仪以及近红外


自动测定法等


[5]

< p>
。总的来说，测定蛋白质的含量一般是利用蛋白质的共同性质如


含氮量、带 电胶体等；还有就是利用蛋白质中特定氨基酸


(


如酪氨酸、苯丙 氨酸



8



和色氨酸残基在紫外光


280 nm


处 的吸光特性


)


来测定蛋白质含量


[6- 7]


。凯氏定氮


法是国标推荐的方法


,


是测定试样中总有机氮最准确和重现性最好的方法之一。


如梁冰 华


[8]


和陈尚文


[9]


分别采用凯氏定氮法测定保健品螺旋藻中蛋白质。但该方


法存在缺陷，


其原理是通过测氮元素的量来计算蛋白质的含量，


氮元素的量越高


代表蛋白质含量越高。这就使得添加的尿素、三聚氰胺等伪蛋白，


在 测定中不会


被发现，从而成功地骗过检验人员进行造假。因此蛋白质的真伪鉴定时


,


可以选


用毛细管电泳法，通过氨基酸成分分 析，


得知氨基酸的组成比例，


进而检测蛋白

的真伪，


也可以选用两种不同的方法分别来测定，


比较测定 的结果来确定蛋白质


的真伪。


双缩脲比色法是国家最新公布的中 华人民共和国农业行业标准


[10]


中乳与

乳制品中蛋白质的测定方法，其检出限为


0.05mg/100g

< br>。考马斯亮蓝法、


Folin-


酚法、双缩脲法具有操作 简便迅速的优点，但灵敏度比较低、操作繁琐、线性范


围窄。


紫 外分光光度法确度较差，


干扰物质较多。


近红外自动测定仪分析 速度快、


分析效率高、适用的样品范围广，对样品无损伤等。但仪器价格昂贵

< p>
,


灵敏度相


对较低。电泳法操作简便、快速、样品 用量少、高自动化等优点。但是也存在核


酸、多糖、脂类等干扰分子，影响检测结果。< /p>



氨基酸的含量测定方法文献报道较多，按分离方法分可分为薄层 色谱法、离


子交换色谱法、反相高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、氨基酸分 析


仪等；


按检测方法分可分为化学分析法、

电化学方法


(


包括电导检测、


安培 检测


)


、


分光光度法


(


包括可见光分光光度法，紫外光分光光度法和荧光分光光度法


)


等


[11-12]


。


范婉萍等


[13]


用分光光度法对富含氨基 酸类成分的制品中氨基酸含量的测定


方法进行了研究探讨


, < /p>


主要利用氨基酸的氨基与茚三酮水合物反应可生成蓝紫


色化合物， 该化合物最大吸收峰在


570nm


波长处，且此吸收峰值的大小 与氨基酸


释放出的氨基成正比，因此可作为氨基酸定量分析方法，但分光光度法，


操作步


骤繁琐、


干扰严重。

< br>目前保健食品中氨基酸的测定主要以高效液相色谱法


（


H PLC


）


或氨基酸分析仪（


AAA


）为主。李天才等


[14]


用氨基酸分析仪 测定了健骨胶囊中


18


种氨基酸。


孙晓 明


[15]


采用氨基酸分析仪测定新型保健食品羊肚菌中氨基酸 ，


结果


测得总氨基酸为


25.67g/ 100g


，


每种必需氨基酸基本接近


F AO/WHO


推荐的模式。


陈


尚文


[16]


对螺旋藻中营养成分进行分析，采用氨基酸分析仪测定其氨 基酸的含量，


结果均表明螺旋藻中氨基酸含量丰富，必需氨基酸数量齐全，总量可达


60%


～


70%


。


高效液相色谱法可实现多种氨基酸的同时检测，


但由于大部分氨 基酸没有



9


紫外吸收，需进行衍生化处理。主要的衍生试剂有邻苯二甲醛


(OPA)

< p>
、异硫氰酸


苯酯


( PITC)

< br>、氯甲酸芴甲酯、丹酰氯、


2,4-


二硝基氟苯


(FDNB)


等。如万丹晶等


[17]


采用柱前衍生化


-


高效液相色谱法测多维氨基酸 片中


18


种氨基酸的含量，该方


法以< /p>


C


18


柱为色谱柱，邻苯二甲醛为衍生剂 ，用


HPLC


法测定，


并与氨基酸分析 仪的


测定值进行比较，结果表明


HPLC


法和


AAA


法的变异系数分别小于


1 .5%


和


3%


，最小

< br>检测量分别为


3 pmol


和


30 pmol


。两种方法 都可用于测定氨基酸，但测定结果存


在差异。


个别种类的保健食 品如氨基酸口服液由于采用单体氨基酸作原料，


不需


水解即可经 纯化后进行高效液相色谱仪衍生分离测定其中含量。如胡建鸿等


[18]


采用异硫氰酸苯酯柱前衍生，


高效液相色谱法同时测定氨基酸保健饮品中天冬氨


酸、谷氨酸、丝氨酸、牛磺酸、甘氨酸、亮氨酸、脯氨酸等


16


种氨基酸。但对于


大多数保健食品如鸡精、螺旋藻等，


由于采用复合氨基酸


(


蛋白质

< br>)


作原料，


必需


经水解成单体氨 基酸后才能进行含量测试


[19]


。


李 想等


[20]


通过酸水解运用氨基酸全


自动分析仪测定了新型保健品纳豆葡萄籽胶囊中


17


种氨基酸的 组成以及含量。


近


年来，毛细管电泳技术因具有高效、快速、简 单、准确、低成本等诸多优点，使


得其在氨基酸的分离分析中发展迅速。



牛磺酸的测定方法有中和滴定法


[21]

< p>
、分光光度法


[22]


、薄层色谱法


[23]


、氨基酸


自动分析仪法

、


高效液相色谱法


[24]


和毛细 管电泳法等


[25]


。


中和滴定法专属 性不强，


且操作繁琐。


分光光度法和薄层扫描法测定牛磺酸所用 仪器简单，


但干扰因素较


多，导致测定结果不准确。氨基酸自动 分析仪和高效液相色谱法具有灵敏度高、


定量准确等优点。如柯加法等

< br>[26]


采用


2 ,4-


二硝基 氟苯柱前衍生，高效液相色谱


法测定口服液类保健食品中牛磺酸的含量。


万玉萍等


[27]


采用邻苯二甲醛作为柱前

< p>
衍生剂，高效液相色谱法检测，测定了口服液、颗粒等保健食品中的牛磺酸，回

收率


98.3%


～


101.7%< /p>


，最低检测限为


4.1 ng


。另外，薛 勇等


[25]


采柱前衍生高效毛


细管电 泳快速测定功能食品与饮品中的牛磺酸，



检出限为


1.6 mg/L


。邹晓莉等


[28]


将脉冲安培检测


-

< p>
高效阴离子色谱引入牛磺酸的分析，无需衍生，分析简便快


速。

< p>
前处理过程中，


由于牛磺酸在食品中呈游离态，


易 溶于水，


可用水直接提取；


对蛋白性食品，可用磺基水杨酸脱蛋 白或超滤法除蛋白。



2.


维生素的检测方法



< p>
脂溶性维生素


A


和维生素


E


的检测，目前已报道主要有比色法，紫外分光光度


法、荧光分 光光度法、


气相色谱法和高效液相色谱法等


[29]

< p>
。


视黄醇醋酸酯和视黄



10



醇棕榈酸酯是维生素


A


存在的酯的形式。保健品中一般添加两者之一或两种均添


加。


通常情况下成分复杂的样品需采用皂化反应后测定其中的视黄醇。


由于视黄


醇不稳定，


前处理过程中容易被氧化 ，


皂化时需要添加抗氧化剂如


BHT(2,6-


二叔


丁基对甲酚


)


、抗坏血酸 、焦酚等。同时需采用内标法才能保证结果的准确。提


取试剂为石油醚、正己烷、


乙酸乙酯等。


如曾红燕


[30


]


用高效液相色谱法同时测定


保健食品中维生素


A


、维生素


D


3


、维生素


E


和


< /p>


一胡萝卜素，样品中加入乙醇、氢


氧化钾及抗坏血酸，

< p>
80


℃水浴皂化


30min


后乙醚提取，旋转蒸干，流动相溶解。


成分相对简单的片剂和胶囊样品可采用溶剂甲醇 、


乙醇，


正己烷等溶剂提取直接


测定其 中的视黄醇醋酸酯或视黄醇棕榈酸酯，


提取方式有超声波振荡两种


[31]


。


如


李雷

< br>[32]


用乙醇和正己烷混合液作为提取液，


以甲醇


+


乙酸乙酯


（


95 +5


）


为流动相，


高效液相色谱法测定 多种维生素样品中维生素


A


醋酸酯，维生素

< br>D3


和维生素


E


醋酸酯的含量。 该方法提取效率高，结果准确，干扰少。李赫


[33]


根据片剂 样品、


粉状胶囊样品、


油状胶囊样品样品剂型的不同分别采用了 超声波提取法和溶剂提


取法不同的提取方法，


反相高效液相色谱 法同时测定保健品中玉米黄素、


叶黄素、




< br>胡萝卜素、


番茄红素四种类胡萝卜素。


视黄醇醋酸酯和视 黄醇棕榈酸酯相对稳


定，采用外标法就能够保证分析结果。维生素


E


一般情况下在保健食品中添加的


是



-


维生素


E


。


检测方法有紫外分光光度法、


高效液相色谱法和气相色谱法 。


前


处理方法同维生素


A


一样，成分简单的试样也可用溶剂提取后直接测定。多数试


样需要在皂化反应 后测定其中的维生素。罗赟等


[34]


采用石油醚


-


乙醚溶解样品和


萃取维生素


E


，


KOH-


甲醇皂化除干扰，毛细 管气相色谱法测定。


孟磊等


[35]


用 石油


醚作萃取剂，在


90


℃水浴中振荡 皂化


30min


，测定样品中维生素


E


含量，


以


98


％的


甲醇作为流动相，检测波长为


292nm

< br>。由于天然维生素


E


有


α


-


、


β


-

< p>
、


γ


-


、


δ


-


4


种形式，在反相色谱 柱上


β


-


和


γ


-


无法分离，一般采用正相色谱法。维生素

D


通


常在保健食品中添加的是维生素


D


2


或者维生素


D

< br>3


。检测方法有紫外分光光度法、


高效液相色谱法


[36-38]


和气相色谱法。成分简单的维生素

D


试样可以采用溶剂提取、


浓缩后测定。如仲宣惟等


[36]


采用高效液相色谱法检测保健食品中维生素

< br>D


2


、维生


素

< br>D


3


的含量。由于维生素


D


见光易分解的不稳定性以及不溶于水的酯溶性问题，


生产厂家将维生 素


D


进行了微囊化处理，外表包裹了一层明胶和糊精，以提高水


溶性、稳定性和分散性。


因此处理过程中单独采用乙醚、


正己烷或石油醚超声提


取样品时，维生素


D< /p>


提取率低。作者采用


60%


的乙醇进行涡 旋振摇，再用


60%


的乙



11



醇


-


正己烷（


1+1


）进行萃取，使维生素


D


能充分溶解出来，萃取率较高。成分复


杂的试样需要在皂化、提取后测定。



水溶性维生素的检测通 常采用高效液相色谱法


[39-42]


。李延志等


[43]


采用高效液


相色谱同时测定维生素补充剂中 维生素


B


6


、烟酰胺和泛酸钙含量，样 品经超声提


取和水浴加热溶解后，


苯基柱分离。


刘敏等


[44]


采用


HPLC


法测定功能性饮料中烟酰


胺、


维生素< /p>


B


12


、


维生素


B


6


、


维生素


B


2


、


维生素


B


1


等多种


B


族维生素的含量。


此外，


维生素


B


1


、维生素


B


2


、维生素


B


6< /p>


还有紫外分光光度法、荧光分光光度法


[45]

< br>。保健


食品中维生素


B


6


以吡哆醇形式存在，烟酸极少使用，基本使用烟酰胺。维生素


B


2


一般以核黄素磷酸盐的形式存在。


保健食品 中添加的泛酸以泛酸钙形式存在。


试


样前处理技术采用超声处理 或溶剂直接溶解。叶酸一般使用弱碱性水溶液提取


,


为保证提取 效果可以在浴中加热。维生素


C


的检测有碘量法、薄层扫描法、


2,4-


二硝基苯肼法，


6-


二氯靛酚滴定法、紫外分光光度法、荧光光度法、电位法和高


效液相色谱 等


[46]


。


但是维生素


C


具有较强的还原性，


在中性和碱性环境下不稳定，


遇热迅速分解，前几种方法操作步骤复杂，具有试剂和试样溶液不稳定、


灵敏度


低、费时等缺点。高效液相色谱法具有高效、快速、稳定、灵敏度高的特 点，适


于保健食品中维生素


C


的快速检 测。如王爱月


[47]


以甲醇和


0.1 %


辛烷磺酸钠为流动


相，在


230 < /p>


nm


波长下测定食品及保健食品中维生素


C


含量，检出限为


0.301



g/mL


，


由于维生素


C


极性较大，在色谱柱上保留时间较短，作者采用辛烷磺酸钠作为离

< br>子对试剂，


可以抑制维生素


C


的 离子化改善峰形


,


以避免在维生素


C


色谱峰前出现


倒峰影响定量结果的准确性。李小娟等

< p>
[48]


用


0.05


m ol/L


磷酸二氢钾


(pH=3)


溶液 稀


释样品后，高效液相色谱法测定保健食品中维生素


C


。雍莉


[49]


用


5g /L


草酸超声提


取样品，


以

< p>


mol/L


NH


4< /p>


A


C


—


HAc< /p>


缓冲溶液


(pH=4.5)


作流动相，< /p>


经


C


18


色谱柱 分离，


高效液相色谱法测定保健食品和果蔬中的维生素


C


，


检出限为


50ng/mL

< br>。


目前维生


素


K1


的检测方法有极谱法、毛细管电泳法、液相色谱法。而极谱法和毛细管电


泳法 适用于微量分析，对常量的维生素，测定误差大，


不适用于保健食品中维生


素


K1


的分析。液相色谱法灵敏度高，分离度好，结 果准确。如龙洲雄等


[50]


采用


液相 色谱法测定保健食品中维生素


K


1


。< /p>



3.


矿物质的检测方法



目前，


我国居民摄入钙量严重不足，


尤其是青少年和 老年人缺钙的比例很高。


为了补充钙，补钙类保健品及补钙制品在国内发展很快，因此， 钙是保健食品，



12

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